[发明专利]一种高效分离禽类胚胎干细胞的方法有效
| 申请号： | 201210516784.4 | 申请日： | 2012-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN103013909A | 公开（公告）日： | 2013-04-03 |
| 发明（设计）人： | 李赞东;蒋斌;燕丽;张文新;万志毅 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/0735 | 分类号： | C12N5/0735 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飞;张庆敏 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种高效分离禽类胚胎干细胞的方法。该方法包括以下步骤：1)将胚盘从种蛋中取出；2)将取出的胚盘消化、清洗并去除卵黄；3)将消化后的胚盘细胞进行原代培养；4)从原代培养的胚盘细胞中富集纯化胚胎干细胞。本发明的方法简单易行，准确有效，可重复性高并且成本低廉，整个分离培养体系中的设备或试剂均可自制或商品化，无需制备饲养层，无需酶消化及相关处理，无需血清，即使从一枚种蛋中也可分离培养出大约2万个纯化过的胚胎干细胞，可以供体外转染进行基因改造或表观修饰，为转基因家禽的制备夯实了技术基础，为生物反应器的发展和实现巨大商业化价值安装了助推加速器，具有极大的科研价值和推广意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 分离 禽类 胚胎 干细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种高效分离禽类胚胎干细胞的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：1)将胚盘细胞从种蛋中取出：将种蛋平放，在种蛋赤道面开口，暴露出胚盘，将胚盘周边卵黄膜剪开后用工具将胚盘细胞取出；2)采用机械方法消化胚盘细胞，清洗胚盘细胞，并去除卵黄；3)将消化清洗后的胚盘细胞进行原代培养；4)从原代培养的胚盘细胞中富集纯化胚胎干细胞。
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