[发明专利]一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法有效
| 申请号： | 201210468427.5 | 申请日： | 2012-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN102924580A | 公开（公告）日： | 2013-02-13 |
| 发明（设计）人： | 李鹏;严洁;马晓燕;周开亚 | 申请（专利权）人： | 南京师范大学 |
| 主分类号： | C07K14/01 | 分类号： | C07K14/01;C07K1/14 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 210046 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法。其内容包括：1）向WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体中加入8M尿素的10mMTris-HCl，pH8.0，剧烈搅动，25℃下用磁力搅拌器不断搅拌3-4小时，使沉淀缓慢溶解；2）4℃，12000rpm离心12min，弃沉淀；3）在所得上清液中加入pH8.0的磷酸盐缓冲液，以pH8.0的磷酸盐缓冲液透析20-22小时，然后用PEG-20000浓缩得可溶性蛋白。利用本发明，WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的复性效率均达到了95%以上，获得了可溶性蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 wssv 膜蛋白 表达 包涵 复性 方法 | ||
【主权项】：
一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法，其特征是包括以下步骤：1）向WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体中加入8M尿素的10 mM Tris‑HCl，pH8.0，剧烈搅动，25℃下用磁力搅拌器不断搅拌3‑4小时，使沉淀缓慢溶解；2）4℃，12000 rpm离心12 min，弃沉淀；3）在所得上清液中加入pH8.0的磷酸盐缓冲液，以pH8.0的磷酸盐缓冲液透析20‑22小时，然后用PEG‑20000浓缩得可溶性蛋白。
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