[发明专利]长爪沙鼠原代肝细胞的培养方法有效
| 申请号： | 201210437161.8 | 申请日： | 2012-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN102952776A | 公开（公告）日： | 2013-03-06 |
| 发明（设计）人： | 陈立青;郭红刚;李长龙;卢领群;萨晓婴;戴方伟;宋晓明 | 申请（专利权）人： | 浙江省医学科学院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310013 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种长爪沙鼠原代肝细胞的培养方法，包括：（1）从消化成熟的离体长爪沙鼠肝脏中收集肝细胞初悬液，过滤，滤液除杂后加入含5%小牛血清的HBSS，反复离心洗涤，收集细胞沉淀于含20%新生牛血清的DMEM完全培养基中，调整肝细胞浓度为3.0×105个～5.0×105个/mL，制备成肝细胞悬液；（2）将肝细胞悬液接种于铺有鼠尾胶原的培养板中，于37℃、5%CO2环境中培养，4h后除杂，将培养基更换成含细胞因子的维持培养基，细胞贴壁过夜后，得到长爪沙鼠原代肝细胞。该方法价格低廉，经济实用，操作简便易行，获得的肝细胞贴壁牢、活力高，培养细胞的成活率高，稳定可靠，适于大规模生产。 | ||
| 搜索关键词： | 长爪沙鼠原代 肝细胞 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种长爪沙鼠原代肝细胞的培养方法，其特征在于，包括步骤：（1）从消化成熟的离体长爪沙鼠肝脏中收集肝细胞初悬液，过滤，滤液除杂后加入含5%小牛血清的Hank′s平衡盐溶液，反复离心洗涤，收集细胞沉淀于含20%新生牛血清的DMEM完全培养基中，调整肝细胞浓度为3.0×105个～5.0×105个/mL，制备成肝细胞悬液；（2）将肝细胞悬液接种于铺有鼠尾胶原的培养板中，于37℃、5%CO2环境中培养，4h后除去死亡及悬浮细胞，将培养基更换成含细胞因子的维持培养基，细胞贴壁过夜后，得到长爪沙鼠原代肝细胞。
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