[发明专利]一种人胆管癌多药耐药细胞建立的新方法

摘要

本发明的一种人胆管癌多药耐药细胞建立的新方法采用药物浓度递增结合高低浓度交替作用合并生长因子刺激法，能提高培养效率，相对于药物浓度递增刺激法，在较短时间内就能建立胆管癌耐药细胞株，可用于分析得到胆管癌细胞化疗耐药后的形态学及生物学习性的变化，筛选得到的化疗药物及判断得出化疗药物的敏感性，分析得到的肿瘤化疗多药耐药机制，体外筛选得到的耐药逆转剂更具有代表性、针对性、可靠性和广谱性。

主权项

一种人胆管癌多药耐药细胞建立的新方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将胆管癌细胞株放入含表皮生长因子浓度为5‑15μg/ml，药物浓度为0.0005‑0.002 μg/ml的培养液中培养2‑4天；2）弃去药物培养液，将步骤1）处理后的胆管癌细胞株放入含表皮生长因子5‑15μg/ml，药物浓度增加的培养液中培养2‑4天；3）重复步骤2），直到药物浓度为0.25‑0.3 μg/ml；4）弃去药物培养液，将步骤3）处理后的管癌细胞株放入含表皮生长因子5‑15μg/ml，药物浓度降低的培养液中培养2‑4天；5）弃去药物培养液，将步骤4）处理后的管癌细胞株放入含表皮生长因子5‑15μg/ml，药物浓度增加的培养液中培养2‑4天；6）重复步骤5），直到药物浓度比步骤3）的药物浓度高0.1‑1μg/ml；7）重复步骤4）、步骤5）和步骤6），每次重复后药物浓度均比上一次重复后的药物浓度高0.1‑1 μg/ml，直到药物浓度为0.8‑1.5 μg/ml为止。