[发明专利]一种从菝葜中提取高纯度抗肿瘤物质氧化白藜芦醇的方法

摘要

本发明涉及医药领域，特别涉及一种从菝葜中提取高纯度抗肿瘤物质氧化白藜芦醇的方法，本发明采用酶解后二氧化碳超临界萃取，粗产物又通过三次柱层析提纯的工艺。整套工艺成熟、稳定、产率高，终产物纯度好，能够应用于许多分析实验和精密配制。

主权项

一种从菝葜中提取高纯度抗肿瘤物质氧化白藜芦醇的方法，其特征在于，依次通过下列步骤实现：1）取菝葜粉碎成40目粗粉；配置ph值为6.5，酶浓度为5g/L的纤维素酶酶解液；取菝葜质量数与酶解液体积数之比为1：20，酶解温度为40‑45℃，酶解8小时；2）将酶解后的菝葜滤出，与85%的乙醇混合成悬浮物，加热至50℃，施压30MPa，采用CO2超临界流体以10kg/h的速度进行萃取；控制分离压力5.5 MPa，对CO2流体与萃取物进行减压分离；得总产物；3）将总产物加入热水至溶解，溶液通过AB‑8大孔吸附树脂；先用水洗去杂质，再用6倍柱体积的75%乙醇以6倍柱体积/小时洗脱目标产物；洗脱液采用负压成膜浓缩，干燥，得粗品A；4）将粗品A进行硅胶柱层析，工艺条件为：采用100目硅胶，粗品A与硅胶质量比：1：50，采用氯仿‑甲醇体积比5：1的洗脱剂，洗脱流速为0.5倍柱体积/小时，洗脱体积为30倍量柱体积；浓缩洗脱液，干燥，得粗品B；5）将粗品B进行葡聚糖凝胶Sephadex LH‑20纯化，纯化条件：粗品B与Sephadex LH‑20质量比为 1：100，采用正己烷‑二氯甲烷‑甲醇体积比为10：15：75的溶剂洗脱体系，洗脱流速0.3mL／min，洗脱体积为3倍量柱体积；浓缩洗脱液，干燥，得粗品C；6）将粗品C进行C18反相硅胶纯化，纯化条件：粗品C与C18反相硅胶质量比为1：100，采用甲醇‑水体积比为35：65溶剂洗脱体系，洗脱流速15ml/小时，洗脱体积为5倍量柱体积；浓缩，干燥，即得高纯度氧化白藜芦醇。