[发明专利]一种纤维素戊糖中温降解产氢菌的分离方法

摘要

一种纤维素戊糖中温降解产氢菌的分离方法，它涉及一种中温产氢菌的分离方法。它解决了目前大多数产氢菌都是在高温下分离，且分离出来的产氢菌不能直接利用纤维素进行产氢的问题。其特征在于它是通过以下步骤实现：1.菌悬液的制备；2菌悬液A的富集；3按不同pH值对菌悬液A进行选择性富集；4对不用pH下的富集液倍比稀释以微晶纤维素为底物进行滚管5挑取滚管中的透明圈至戊糖液体培养基培养6检测液体培养基中的气相，有氢气产生的即为目的细菌7重复步骤4到步骤6五次，即可分离。本发明分离纤维素戊糖中温产氢菌的方法能在中温下分离，且分离出的产氢菌不仅能利用纤维素发酵产氢还可用于戊糖发酵产氢。

主权项

一种纤维素戊糖中温降解产氢菌的分离方法，其特征在于纤维素戊糖中温降解产氢菌的分离方法是通过以下步骤实现：一、取菌源进行培养，得悬浊液；二、取步骤一得到的悬浊液以体积百分比为1%的接种量接种于以葡萄糖为碳源的液体培养基中，在37℃培养箱中培养4~6d，得菌悬液A；三、以结晶纤维素为底物，在以纤维素为碳源的液体培养基初始pH为5.5~7.5，温度为37℃的条件下对菌悬液A进行厌氧富集培养7d；四、然后取富集培养后的菌悬液B按体积百分比为10%的接种量接种于以纤维素为碳源的液体培养基中继续在pH为5.5~7.5，温度为37℃的条件下富集培养2~3d；五、重复步骤四3~5次，得菌悬液B；六、取步骤五得到的菌悬液B用无菌水按10‑1、10‑2、10‑3、10‑4和10‑5的倍数进行稀释，将10‑5倍数稀释后的菌悬液B按10%的接种量接种于pH为5.5~7.5的微晶纤维素固体培养基中，在37℃培养箱中培养至出现透明圈；七、在无菌环境下，用氮气针挑取一个的步骤六中透明圈直径为6~10mm的菌落至以戊糖为碳源的液体培养基中，在37℃培养箱中培养1~3d；八、重复步骤六至步骤七5次，即完成纤维素戊糖中温降解产氢菌的分离；其中，步骤一中所述的菌源为牛瘤胃内含物。