[发明专利]一种石斑鱼虹彩病毒（SGIV）灭活疫苗的转瓶生产方法有效
| 申请号： | 201210240292.7 | 申请日： | 2012-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN102727879A | 公开（公告）日： | 2012-10-17 |
| 发明（设计）人： | 秦启伟;欧阳征亮;魏京广;黄晓红 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 主分类号： | A61K39/12 | 分类号： | A61K39/12;A61P31/20;C12N7/00 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星 |
| 地址： | 510301 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种石斑鱼虹彩病毒（SGIV）灭活疫苗的转瓶生产方法。它包括细胞的转瓶培养、病毒的扩增和收获和病毒灭活。应用本发明的石斑鱼虹彩病毒（SGIV）灭活疫苗的转瓶生产方法可以大规模的生产石斑鱼虹彩病毒（SGIV）灭活疫苗，由于是工业流程化生产，其生产成本低、劳动强度小，生产出来的石斑鱼虹彩病毒（SGIV）灭活疫苗经过疫苗检验，从细胞水平和鱼体水平证明该石斑鱼虹彩病毒灭活疫苗是安全的，疫苗效力检测证明，本发明的石斑鱼虹彩病毒（SGIV）灭活疫苗的相对保护率为87.0%~95.7%，说明此石斑鱼虹彩病毒（SGIV）灭活疫苗对受免石斑鱼提供了显著的保护，具有良好的免疫保护效力，且批间质量稳定。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 石斑鱼 虹彩 病毒 sgiv 疫苗 生产 方法 | ||
【主权项】：
一种石斑鱼虹彩病毒（SGIV）灭活疫苗的转瓶生产方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）细胞的转瓶培养：将石斑鱼脾组织细胞接入转瓶中，加入细胞生长液，充分摇匀后置于转瓶机上培养，培养温度为28℃，转速为16~20转/小时，所述的细胞生长液为：含体积分数8~10%的胎牛血清、质量分数0.266%NaCl和5mM HEPES的L15培养基；（2）病毒的扩增和收获：转瓶培养石斑鱼脾组织细胞直至长满单层，接种0.01MOI的石斑鱼虹彩病毒于对数生长期的石斑鱼脾组织细胞中，于28℃培养，转瓶机转速设置为16~20转/小时，培养2~3小时以吸附病毒，随后将转瓶机转速设为3~5转/小时，以扩增病毒，观察病毒病变效应，直至细胞病变完全，然后反复冻融2~3次；（3）将冻融后的病毒液中的病毒灭活后获得石斑鱼虹彩病毒灭活疫苗。
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