[发明专利]鱼精蛋白的纯化工艺有效
申请号: | 201210203844.7 | 申请日: | 2012-06-20 |
公开(公告)号: | CN103509098A | 公开(公告)日: | 2014-01-15 |
发明(设计)人: | 陆海波;王冉;李正想;曹云婷;花琼琼 | 申请(专利权)人: | 徐州万邦金桥制药有限公司;上海复星医药产业发展有限公司 |
主分类号: | C07K14/46 | 分类号: | C07K14/46;C07K1/20 |
代理公司: | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人: | 张慧清 |
地址: | 221004 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及制药领域,特别是涉及蛋白的纯化领域,更为具体的说涉及鱼精蛋白的纯化工艺。为了解决现有技术中鱼精蛋白纯度低的问题。本发明通过反向硅胶填料的层析分离方式,通过洗脱液中水相和有机相的比例调节,一步层析就可以除去鱼精蛋白中的非功能性杂质蛋白。不仅提高了产品的质量,达到国际水平,符合美国药典(USP)、英国药典(BP)的相关规定,而且提高了产品的安全性。 | ||
搜索关键词: | 鱼精蛋白 纯化 工艺 | ||
【主权项】:
鱼精蛋白的纯化工艺,其特征是包括以下步骤:a.将鱼精蛋白溶解于pH4.0~5.0的缓冲溶液中,过滤,取清液,得到鱼精蛋白样品;b.选择反向柱;c.将鱼精蛋白上样,并用pH4.0~5.0的缓冲溶液平衡反相层析柱;d.分阶段洗脱:A相,pH4.0~5.0的缓冲溶液,B相,pH4.0~5.0的有机缓冲溶液,所述B相中有机溶剂浓度为10~20%(体积百分比),所述有机溶剂选自乙腈、甲醇、乙醇,第一阶段,洗脱液B为15%~20%,等度洗脱,收集洗脱液Ⅰ,第二阶段,洗脱液B为25%~35%,等度洗脱,收集洗脱液Ⅱ,第三阶段,洗脱液B为100%,等度洗脱,收集洗脱液Ⅲ;e.取洗脱液Ⅱ,加入稀硫酸,再加入95%乙醇溶液,过滤,取沉淀;f.收集步骤e中沉淀,干燥,得鱼精蛋白纯化产品。
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