[发明专利]一种胚性材料的超低温冷冻保存方法有效
| 申请号: | 201210135145.3 | 申请日: | 2012-05-04 |
| 公开(公告)号: | CN102657152A | 公开(公告)日: | 2012-09-12 |
| 发明(设计)人: | 陈金慧;龙伟;施季森 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
| 主分类号: | A01N3/00 | 分类号: | A01N3/00 |
| 代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 邱兴天 |
| 地址: | 210037 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种胚性材料的超低温冷冻保存方法,包括以下步骤:取待保存的胚性材料接种入高渗液体培养基,25℃培养3~10d;过滤胚性材料装入冷冻管,加入复合玻璃化保护剂,0℃放置脱水0~70min,然后装入冷冻盒直接投入液氮速冻,液氮中长期保存即可。本发明的胚性材料的超低温冷冻保存方法,操作简单,方便可行,解决了林木体胚产业化的重要瓶颈问题,可实现胚性材料长期保存到1年以上,并能使其保持高频增殖能力,具有很好的实用性,能够产生很好的经济效益和社会效应。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 材料 超低温 冷冻 保存 方法 | ||
【主权项】:
一种胚性材料的超低温冷冻保存方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取待保存的胚性材料,按10%的接种量接入高渗液体培养基,25℃,培养3~10d;其中,高渗液体培养基为添加有0.1~0.8mg/L山梨醇的M13基本培养基;(2)过滤步骤(1)预培养的胚性材料,装入冷冻管,向冷冻管中加入复合玻璃化保护剂,0℃,放置脱水0~70min,然后装入冷冻盒直接投入液氮速冻,液氮中长期保存;复合玻璃化保护剂为添加30%甘油和30%乙二醇的M13基本培养基。
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