[发明专利]一种台湾长寿菜的快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种台湾长寿菜的快速繁殖方法，主要通过对初代培养、继代培养、增殖培养、生根培养以及炼苗移栽、后期管理的步骤，达到了增殖速度快、遗传性状稳定、繁殖系数高、苗生长旺盛的优良效果，愈伤组织的萌动率达到了96%，增殖倍数达到了4.7倍，生根率达到了100%，最终的成活率达到了96%。

主权项

一种台湾长寿菜的快速繁殖方法，其特征在于该方法包括下列步骤：（1）外植体的选择：于5～7月采取生长健壮的长寿菜叶片或块茎作外植体；（2）材料处理方法：先用软毛刷将外植体表面的灰尘轻轻刷去，用流水冲洗1 h后用紫外灯照射10 min，转入超净工作台，在超净工作台上先用70%的乙醇浸泡20‑50秒，然后用无菌水冲洗，再转入滴加了2～3滴土温80的0. 1 %的升汞溶液中浸泡5‑7min，依时间长短用无菌水冲洗3～4次，最后在无菌条件下分割材料，茎段切割成0. 1～0. 6 cm长，叶片分割成约0. 3 cm ×0. 3 cm的小片； （3）初代培养：在无菌的条件下将步骤（2）得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在MS常规培养基中添加了0.5mg/L的2,4‑D、0.4mg/L的BA、0.4mg/L的NAA、 0.5mg/L 蛋白酪、0.5mg/L的GA，PH 6.0，培养温度为24℃，光照周期13h/d，光强度为2000‑2200lux，待培养25天左右后，新芽长至3.0cm左右时，即开始下一个阶段；（4）继代培养：将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养基上，该培养基是在3/4MS常规培养基中添加了0.5mg/L的6‑BA、0.4mg/L的NAA、 0.5mg/L 蛋白酪、0.3mg/L的IBA、0.3mg/L的KT，PH 6.0，培养温度为24℃，光照周期13h/d，光强度为2000‑2200lux，待新芽长至2.0cm时，即开始下一个阶段；（5）生根培养：将继代培养的外植体新芽剪下接种在生根培养基上，该培养基是在1/3MS常规培养基中添加了0.6mg/L的IBA、0.6mg/L的NAA，0.3mg/L的KT，0.4mg/L的NAA、 0.5mg/L 蛋白酪、PH 6.0，培养温度为24℃，光照周期13h/d，光强度为2200lux，待新苗长至2.5cm时，即开始下一个阶段；（6）炼苗：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗6d，然后解开封口膜，炼苗4d，炼苗期间适当遮光，使光照强度为自然光的50%，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的重量比腐殖土∶草炭∶珍珠岩：蛭石=3∶3∶1：2 的混合基质中，温度控制在29℃，前7d 湿度控制在85%左右，以后逐渐降低湿度;(7) 移栽:移栽时间10月12‑22日将扦插播种成活的小苗移栽到预先准备好的苗圃地，选择地势平坦，排水良好，土层深厚肥沃的土地建立苗圃地；移栽方法　移栽前将苗圃地做成长5m、宽2.5ｍ的低床，施足底肥，然后将扦插苗按15cm×25 cm株行距进行移栽，移栽深度2.5 cm，移栽后及时浇透水；移栽苗管理 生长期每隔15ｄ叶面喷施有机复合肥100倍溶液，大田苗移栽后，移植苗成活率达到96%以上；所述的有机复合肥的制备方法为：该复合肥按照如下方法制备：（a）按所述重量份数选取配方量的原料；所述原料为：尿素5‑20%，磷酸一铵2‑5%，硫酸钾4‑5%，磷酸二氢钾4‑6%，腐植酸10‑15%，木质素5‑7%,BA3‑5%，水5‑10%，壳聚糖1‑5%，硼砂3‑7%，氯化锌0.5‑1%，钼酸钠0.05‑0.3%，硫酸锰0.05‑0.1%，十二烷基苯磺酸钠0.05‑0.3%，硫酸亚铁0.8‑2%，硫酸镁0.03‑0.8%，硫酸铜0.01‑0.05%，二甲基亚砜0.2‑2%；大田作物秸秆2‑10%，禽畜粪便2‑3%；所述禽畜粪便为猪粪、牛粪、羊粪、鸡鸭粪中的一种或任意几种混合；（b）将所述植物纤维粉碎为粉末；（c）将所述禽畜粪便、植物纤维粉末混合、拌匀，在发酵池中堆置湿料发酵，上覆保湿保温材料，经过60小时后，堆内温度达到50‑70℃时第一次翻堆，并每隔24小时翻堆一次，经过3次翻堆后，发酵结束；（d）将发酵产物与所述的尿素，磷酸一铵，硫酸钾，磷酸二氢钾，纳米硫酸亚铁，纳米碳，腐植酸，木质素,BA，水，壳聚糖，硼砂，氯化锌，钼酸钠，硫酸锰，十二烷基苯磺酸钠，硫酸亚铁，硫酸镁，硫酸铜，二甲基亚砜混合放入反应釜中，用水溶解，在100‑120℃下搅拌混合反应2小时；待混合工艺完成后，用200目筛过滤溶液，去掉残渣。