[发明专利]基于离子通道和适配体制备生物传感器检测凝血酶的方法

摘要

本发明公开了一种基于离子通道和适配体制备生物传感器检测凝血酶的方法，属于生物传感器领域，所述的检测方法在离子通道上修饰DNA适配体，并采用P-ATP的混合溶液进行处理，最后进行喷金作为工作电极，得到基于离子通道和适配体的生物传感器对凝血酶进行检测。本发明的优点在于简单快速，灵敏度高，选择性好，可以进行实际样品中的检测，对凝血酶的最低检测浓度达到1pM，并且线性范围较大。在3nM-50nM浓度范围内，检测后的方波伏安峰电流和浓度的对数呈线性关系；峰电流值稳定，第10圈与第100圈峰值相差在3％以内；具有很强的专一性、重复性和实用性，在实际样品中的回收率在92％～105％范围。

主权项

基于离子通道和适配体制备生物传感器检测凝血酶的方法，其特征在于：第一步：离子通道的制备：将刻蚀液9M NaOH溶液滴在PET膜的一面上，在35摄氏度的温度下，进行刻蚀；第二步：DNA适配体的配置与准备：在PBS缓冲溶液中加入DNA适配体，形成DNA适配体溶液，DNA适配体溶液放置在90摄氏度水浴下5分钟，然后自然冷却到常温；第三步：P‑ATP的配置：以无水乙醇为溶剂，向溶剂中加入P‑ATP，得到含有10mM的P‑ATP的乙醇溶液；第四步：在第一步制备的离子通道上修饰第二步中制备的DNA适配体：将刻蚀好离子通道的PET膜放入DNA适配体溶液中，浸泡18小时以上；用去离子水冲洗表面，用滤纸吸干，再将其浸泡在第三步所配置的P‑ATP的混合溶液中12小时，用去离子水冲洗表面，也用滤纸吸干表面；第五步：喷金作为工作电极：在第四步处理好的PET膜的一面喷上纳米金，得到基于离子通道和适配体的生物传感器；第六步：应用第五步中的生物传感器进行检测。