[发明专利]一种分离及培养人胚嗅鞘细胞的方法无效
申请号: | 201110447745.9 | 申请日: | 2011-12-27 |
公开(公告)号: | CN102559595A | 公开(公告)日: | 2012-07-11 |
发明(设计)人: | 吴卫江 | 申请(专利权)人: | 吴卫江 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079;C12N5/073 |
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地址: | 214000 江苏省无*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提出一种分离和培养人胚嗅鞘细胞的方法,所述方法包括如下步骤:OECs的分离培养;培养皿的包被;OECs的纯化;以及OECs的染色鉴定。本发明的分离及培养人胚嗅鞘细胞的方法,OECs经培养2~14天后仍保持雪旺细胞的双极和三极形态,细胞排布由杂乱无章,走向排列一致;采用适量的DMSO有保护轴突及髓鞘、减少水肿、促进神经周围血液流速、稳定细胞溶酶体膜和清除自由基之功效。 | ||
搜索关键词: | 一种 分离 培养 人胚嗅鞘 细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种分离及培养人胚嗅鞘细胞的方法,其包括下述步骤:S1:取2‑3月龄流产胎儿,解剖显微镜下分离出两侧嗅球,移入含D‑Hank’s液的培养皿;S2:在解剖显微镜下去除毛细血管网,将嗅球最外层的嗅神经层、小球层连同包被的软膜一起剥下;S3:用D‑Hank’s液洗2次,用虹膜剪剪碎后用0.25%胰酶37℃消化30min,加入含血清培养液终止消化;S4:使用200目滤网过滤去除大块组织,过滤液600g离心5min;以及S5:弃上清,用含Forskolin和BPE的全培养液重悬,调整细胞浓度为1×105/ml,接种于p75包被的培养皿;每2天换液1次。
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