[发明专利]一种将木糖异构酶基因用于花生遗传转化的筛选方法有效
| 申请号： | 201110361128.7 | 申请日： | 2011-11-15 |
| 公开（公告）号： | CN102433354A | 公开（公告）日： | 2012-05-02 |
| 发明（设计）人： | 乔利仙;丁霄;隋炯明;王晶珊;刘文平 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12Q1/68;A01H4/00;A01H5/00 |
| 代理公司： | 青岛联智专利商标事务所有限公司 37101 | 代理人： | 崔滨生 |
| 地址： | 266109 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种将木糖异构酶基因用于花生遗传转化的筛选方法，它包括构建含有目的基因的重组载体；将重组载体转化花生胚小叶外植体；将转化后胚小叶外植体转移到添加有蔗糖和木糖的诱导培养基上进行培养，直至诱导出体胚；将体胚转移到萌发培养基上进行培养，直至诱导成苗；对再生苗进行PCR检测，获得转基因阳性植株；将转基因阳性植株通过嫁接方法移栽田间。本发明使用添加了5g/L的蔗糖和10g/L的木糖的培养基进行培养，非转化体由于不能利用木糖生长受到抑制不能成苗，转化体由于能够利用木糖可以再生成苗，因此可以筛选出转基因植株，避免了使用抗生素进行筛选可能造成的安全隐患；转化效率高，是一种安全、高效的筛选方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 将木糖异构酶 基因 用于 花生 遗传 转化 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种将木糖异构酶基因用于花生遗传转化的筛选方法，其特征在于它包括以下步骤：(1) 将目的基因插入到含木糖异构酶基因xylA的植物表达载体中，构建含有目的基因的重组载体；(2) 将重组载体转化花生胚小叶外植体；(3) 将转化后胚小叶外植体转移到添加有蔗糖和木糖的诱导培养基上进行培养，4~5周后诱导出体胚；(4) 将体胚转移到添加有蔗糖和木糖的萌发培养基上进行培养，4~5个月后诱导成苗；(5) 对再生苗进行PCR检测，获得转基因阳性植株；(6) 将转基因阳性植株通过嫁接方法移栽田间。
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