[发明专利]一株2-酮基-D-葡萄糖酸高产菌株的筛选方法及该菌株的发酵方法

摘要

本发明阐述了一株高产2-酮基-D-葡萄糖酸沙雷氏菌的筛选方法及应用该菌株生产2-酮基-D-葡萄糖酸，属于生物工程领域。本发明是称取约0.2g土壤于20ml 0.85％无菌生理盐水中，振荡混匀之后将菌悬液涂布至5％盐浓度的牛肉膏蛋白胨培养基上30℃培养36h，将产紫红色素的菌落经发酵培养基培养后，采用内标法经高效液相色谱进行定性分析，并对筛选菌株进行形态学、生理生化及分子生物学鉴定，获得的一株高产2-酮基-D-葡萄糖酸的沙雷氏菌；本发明同时公开一种采用该菌生产2-酮基-D-葡萄糖酸的方法，采用本方法发酵36h2-酮基-D-葡萄糖酸的产量为181.2g/L。

主权项

一种2‑酮基‑D‑葡萄糖酸高产菌沙雷氏菌的筛选方法，其特征为：1)沙雷氏菌的初步分离纯化称取约0.2g土壤于20ml 0.85％无菌生理盐水中，振荡混匀之后将菌悬液涂布至5％盐浓度的牛肉膏蛋白胨培养基上30℃培养36h，将产紫红色素的菌落作为进一步筛选的疑似菌株，编号保存；2)产2‑酮基‑D‑葡萄糖酸沙雷氏菌的筛选将上述分离纯化得到的菌种接种于5％葡萄糖的牛肉膏蛋白胨培养基中，培养36h后离心收集发酵液，发酵液采用内标法经高效液相色谱进行定性分析，使得2‑酮基‑D‑葡萄糖酸钙标准品峰高增高的菌株即为产2‑酮基‑D‑葡萄糖酸的沙雷氏菌。