[发明专利]一种检测大气纳米颗粒和工业纳米颗粒细胞毒性差异的方法

摘要

本发明涉及一种检测大气纳米颗粒和工业纳米颗粒细胞毒性差异的方法，步骤如下：a.用培养基配成细胞悬浮液，接种于细胞培养皿中，将培养皿置于培养箱中培养24小时；b.将配制的颗粒物溶液与培养基混合，配成染毒溶液；用D-hank`s平衡盐溶液清洗细胞；对细胞进行染毒，放入培养箱中培养4小时；c.加入DCFH-DA荧光探针与培养基的混合溶液，用锡箔纸密闭包裹，放入培养箱中培养0.5小时；d.在倒置荧光显微镜下观察荧光强度及荧光分布，并拍照；e.通过荧光分析软件处理图片得到初始数据并分析比较。本方法??细胞制片快速简单，原材料容易购买；细胞检测方法结果准确，影响因素较少，并可同时检测多种纳米颗粒；实验试剂安全可靠，没有较大的毒性。

主权项

一种检测大气纳米颗粒和工业纳米颗粒细胞毒性差异的方法，其特征在于，它的操作顺序和步骤如下：a. 把用胰酶消化下来的细胞吸入离心管中，弃去上清液，加入培养基配成细胞悬浮液，并用移液枪吹打使细胞分散均匀，接种于细胞培养皿中，将培养皿置于培养箱中培养24小时；b.将配制的颗粒物溶液与培养基混合，配成染毒溶液；使用移液枪将细胞培养皿中废液吸出，用D hank`s平衡盐溶液清洗细胞；然后用移液枪吸取染毒溶液滴加到细胞培养皿中，放入培养箱中培养4小时；c. 用D Hank`s平衡盐溶液清洗细胞，然后分别加入DCFH DA荧光探针与培养基的混合溶液，用锡箔纸密闭包裹，放入培养箱中培养0.5小时；d.用D Hank`s平衡盐溶液清洗细胞，在倒置荧光显微镜下观察荧光强度及荧光分布，并拍照；e. 通过荧光分析软件处理图片得到初始数据并比较分析。