[发明专利]PCL-g-PGMA/明胶复合材料在细胞转染中的应用有效
申请号: | 201110228854.1 | 申请日: | 2011-08-10 |
公开(公告)号: | CN102675677A | 公开(公告)日: | 2012-09-19 |
发明(设计)人: | 马洁;袁伟;李春燕;徐福建;赵平 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院肿瘤研究所 |
主分类号: | C08J7/16 | 分类号: | C08J7/16;C08J7/12;C08J7/04;C08L67/04;C12N15/87;C12N15/79 |
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摘要: | 本发明公开了一种PCL-g-PGMA/明胶复合材料在细胞转染中的应用。由于本发明使用的PCL-g-PGMA/明胶复合材料既可以直接吸附细胞,也可以吸附PEI/DNA或其他阳离子转染试剂/DNA复合物。因此本发明在国内外首次提出如图所示的新型转染方法:A方式为材料上粘附细胞后直接进行转染;B方式为材料上吸附PEI/pDNA复合物后再粘附细胞实现细胞的被动转染;C方式为材料上吸附PEI/pDNA复合物后再粘附细胞实现细胞的第一次转染,一天后再进行第二次转染。通过获得GMA功能化修饰聚合物支架,可以实现细胞的两次转染,大大提高了基因转染的效率。 | ||
搜索关键词: | pcl pgma 明胶 复合材料 细胞 转染 中的 应用 | ||
【主权项】:
PCL‑g‑PGMA/明胶复合材料在细胞转染中的应用;所述PCL‑g‑PGMA/明胶复合材料是按照包括下述步骤的方法制备得到的:1)制备聚ε‑己内酯膜;2)将所述聚ε‑己内酯膜置于1,6己二胺的丙醇溶液中浸泡,得到部分端基为氨基的聚ε‑己内酯膜PCL‑NH2;将膜取出,依次用乙醇、水、乙醇进行清洗并干燥;3)将步骤2)得到的干燥膜PCL‑NH2置于由2‑溴‑异丁基酰溴、三乙胺和正己烷组成的混合溶液中进行酯化反应,得到表面溴化的聚ε‑己内酯膜PCL‑Br;将膜取出,依次用乙醇、水、乙醇进行清洗并干燥;4)在无氧条件下,以步骤3)得到的干燥膜PCL‑Br为引发剂、甲基丙烯酸缩水甘油酯为接枝单体、溴化铜和溴化亚铜为催化剂、2,2联吡啶为配位剂,甲醇与水的混合溶液为溶剂,进行原子转移自由基聚合反应,得到聚ε‑己内酯/甲基丙烯酸缩水甘油酯接枝共聚物,即PCL‑g‑PGMA;将PCL‑g‑PGMA膜取出,依次用乙醇、水、乙醇进行清洗并干燥;5)将步骤4)得到的干燥PCL‑g‑PGMA膜在明胶水溶液中浸泡,取出后用去离子水清洗并干燥,得到PCL‑g‑PGMA/明胶复合材料。
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