[发明专利]一种水体沉积物或土壤中雌激素结合体的检测方法

摘要

一种水体沉积物或土壤中雌激素结合体的检测方法，基于加速溶剂萃取(ASE)-固相萃取(SPE)-液相色谱/串联质谱联用(LC/MS/MS)技术对水体沉积物或土壤中四种雌激素结合体E1-3S、E2-3S及E1-3G、E2-3G进行检测，以乙腈/水(v/v)＝9∶1为萃取剂进行加速溶剂萃取提取沉积物中的雌激素结合体，用NH2柱对提取液进行初步净化后，再用HLB柱进一步净化。初步用NH2柱净化萃取液，可以除去非极性较强的物质，减弱基质干扰对后续HLB柱富集的影响，提高了净化效果和回收率。本方法对雌激素的四种结合体E1-3S、E2-3S及E1-3G、E2-3G的回收率均在83-108％，检测限低于0.04ng/g，满足沉积物或土壤样品中痕量雌激素结合体的检测要求。

主权项

1.一种水体沉积物中痕量雌激素-硫酸盐结合体的定量测定方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)沉积物样品提取将采集的沉积物样品进行冷冻干燥后，以体积比为9∶1的乙腈/水为萃取剂，用快速溶剂萃取(ASE)提取沉积物中的雌激素结合体；然后采用旋转蒸发仪浓缩样品至1ml左右，用氮气吹干并用甲醇溶解残渣，待净化。(2)固相萃取(SPE)净化甲醇溶解的残渣，首先通过活化好的NH2柱，0.5％氨水甲醇溶液的5ml洗脱液与适量的超纯水混合，然后，将混合好的样品通过HLB柱，进行富集和进一步净化。(3)利用液相色谱-串联质谱分析雌激素结合体MS离子源：电喷雾离子化源(ESI)，负离子方式检测；离子喷射电压：-4500V温度：450℃；源内气体1(GS1)，N₂，压力：45psi；气体2(GS2)，N₂，压力：45psi；气帘气体，N₂，压力：20psi；扫描方式为多重反应监测(MRM)；碰撞气，N₂，压力：Medium；HPLC色谱柱：Nova-Pak C18，3.9mm×150mm×4μm，Waters公司，其中，HPLC流动相梯度洗脱条件为：(4)标准曲线的绘制，以外标法进行定量测定外标法标准曲线的绘制：利用分析天平准确称量雌激素结合体，溶于色谱纯乙腈内，配置成系列浓度的标准溶液，采用液相色谱-串联质谱联用进行分析，分别以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行回归，得到标准曲线，用于测定样品中分析物的量。(5)样品的测定采集待测沉积物样品，按步骤(1)对土壤样品进行冷冻干燥和萃取，再按步骤(2)进行提取物的净化，然后用液相色谱-串联质谱联用检测，并与步骤(4)得到的标准曲线比较，通过换算最终得到待测沉积物样品中雌激素结合体的含量。