[发明专利]一种用于肿瘤细胞三维培养的水凝胶的制备方法

摘要

本发明公开了一种用于肿瘤细胞三维培养的水凝胶的制备方法,应用聚甲基乙烯基醚马来酸酐水解产物甲基乙烯基醚马来酸共聚物和交联剂聚乙二醇、聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯丙交酯三嵌段共聚物、聚-ε-己内酯丙交酯-聚乙二醇-聚-ε-己内酯丙交酯三嵌段共聚物或葡聚糖进行交联反应，通过调整甲基乙烯基醚/马来酸共聚物中羧基和交联剂中羟基的比例，获得不同交联密度的凝胶，交联后凝胶中多余的羧基再用聚乙二醇单甲醚进行酯化，最后将获得的凝胶配成5%的水溶液，再用弱碱，如饱和碳酸氢钠水溶液进行中和，至pH=7.0，制得可适合用作肿瘤细胞三维培养基质的水凝胶。

主权项

一种用于肿瘤细胞三维培养的水凝胶的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：步骤一：将不同质量的交联剂：聚乙二醇、聚乙交酯丙交酯‑聚乙二醇‑聚乙交酯丙交酯三嵌段共聚物、聚‑ε—己内酯丙交酯—聚乙二醇‑聚‑ε‑己内酯丙交酯三嵌段共聚物、聚乙交酯‑聚乙二醇‑聚乙交酯三嵌段共聚物、聚丙交酯‑聚乙二醇‑聚丙交酯三嵌段共聚物、聚‑ε‑己内酯‑聚乙二醇‑聚‑ε‑己内酯三嵌段共聚物或右旋糖酐中的一种或几种的组合，溶于二次蒸馏水中，获得不同浓度的交联剂水溶液；步骤二：将上述不同浓度的的交联剂的水溶液加入到同一份聚甲基乙烯基醚马来酸水溶液中，充分搅拌混合均匀后，在加热条件下旋转蒸发除去大部分的水，然后置于烘箱中在60‑120℃的条件下交联12小时到72小时, 获得交联的水凝胶固体；步骤三：在交联的水凝胶固体中加入二次蒸馏水，获得交联的水凝胶溶液，再按聚甲基乙烯基醚马来酸水溶液中聚甲基乙烯基醚马来酸的羧基的物质的量（n‑COOH/mol）和交联剂水溶液中交联剂中羟基的物质的量（n‑OH/mol）的比率（n‑COOH : n‑OH）为50：1 ‑ 3000：1的量，加入聚乙二醇单甲基醚水溶液，混合均匀，在加热条件下旋转蒸发除去大部分的水，然后置于烘箱中在60‑120℃的条件下酯化12小时到72小时, 将步骤二中未交联的羧基进行酯化成水凝胶固体；步骤四：或者将步骤一中已经配好的交联剂水溶液再加入一定量的酯化剂聚乙二醇单甲醚，获得不同浓度的包含酯化剂和交联剂水溶液；将上述不同浓度的酯化剂和交联剂的水溶液加入到同一份聚甲基乙烯基醚马来酸水溶液中，充分搅拌混合均匀后，在加热条件下旋转蒸发除去大部分的水，然后置于烘箱中在60‑120℃的条件下交联12小时到72小时, 获得交联的水凝胶固体；步骤五：按质量比为1：19的比例将经上述步骤三或步骤四获得的交联后的水凝胶固体溶于二次蒸馏水进行溶胀，在搅拌条件下获得均相澄清的水凝胶溶液，再逐滴滴加碱溶液，直到水凝胶溶液的pH值等于7为止，便获得最终的水凝胶溶液。