[发明专利]一种青霉菌源壳聚糖酶基因及其制备方法无效
申请号: | 201110205984.3 | 申请日: | 2011-07-21 |
公开(公告)号: | CN102250858A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 朱旭芬;吴敏;张文武 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;C12N5/10;C12N15/10;C12R1/19;C12R1/80 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人: | 徐飞虎;徐关寿 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种青霉壳聚糖酶基因克隆及其表达方法。本发明利用单一碳源的特殊培养基进行筛选,获得产壳聚糖酶的青霉菌,采用独特的简并引物进行青霉菌壳聚糖酶基因的片段扩增,然后通过反向PCR的方法获得了全长基因,经确认所得的新型酶基因不含内含子。将该基因克隆到合适表达载体,在大肠杆菌中实现异源表达,酶学研究表明获得的壳聚糖酶基因具有较高的活性。本发明的方法有效可靠,建立了一套行之有效的新型壳聚糖酶基因克隆方法,并最终实现大量的诱导表达,为后续的工业化生产提供成本低廉的壳聚糖酶起始材料。 | ||
搜索关键词: | 一种 青霉 菌源壳 聚糖 基因 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种壳聚糖酶蛋白,是具有如下(1)或(2)特征的蛋白质:(1)、其氨基酸序列与Seq ID NO.2所示序列一致;(2)、将Seq ID NO.2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失和/或添加且具有壳聚糖酶活性的由(1)衍生的蛋白质。
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