[发明专利]姜荷花的组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明公开了姜荷花的组织培养快速繁殖方法，属于植物组织培养技术领域。方法包括(一)培养基的配制；(二)块根小芽培养与灭菌；(三)外植体无菌苗的培养；(四)不定芽诱导培养；(五)不定芽增殖培养；(六)小苗生根培养；(七)组培苗的炼苗驯化与移栽等步骤。具有增殖培养期短(14-20天)，繁殖系数高(由2-4倍提高到5-8倍)，不定芽一致性好，组培繁育周期短(50-60天)，种苗质量好，移栽成活率可高达95％以上，是一种高效、快速提供优质姜荷花种苗的方法。本方法可在园林绿化与组培苗企业推广应用。

主权项

姜荷花的组织培养快速繁殖方法，其特征在于按以下步骤进行：(一)培养基的配制，包括基本培养基和各阶段培养基的组分及其每升所含的重量为：1)基本培养基：MS或1/2MS培养基；2)无菌苗培养基：1/2MS+白糖20‑30g/L，琼脂5‑8g/L，pH5.6‑5.8；3)不定芽诱导培养基：MS+6‑BA1.0‑3.0mg/L+NAA0.1‑0.3mg/L+白糖20‑30g/L，琼脂5‑8g/L，pH5.6‑5.8；4)增殖培养基：MS+6‑BA1.0‑3.0mg/L+NAA 0.1‑0.3mg/L+白糖20‑30g/L，琼脂5‑8g/L，pH5.6‑5.8；5)生根培养基：1/2MS+NAA0.5‑1.5mg/L+白糖20‑30g/L，琼脂5‑8g/L，pH5.6‑5.8；(二)块根小芽培养与灭菌：选择无病斑、无虫瘦、健壮饱满的姜荷花块根放入生化培养箱中，在26‑28℃、暗培养下催芽至长成0.5‑2.0cm的小芽；取小芽经流水、无菌水冲洗干净，用70％酒精消毒45s，0.1％升汞水溶液浸泡10min灭菌，无菌水冲洗5‑6次后，备用；(三)外植体无菌苗的培养：将灭菌后小芽在超净台上剥取3‑5mm的茎尖作为外植体，接种到无菌苗培养基中，在25±2℃、光强1500Lx、光照12h/d组培条件下培养6‑7天至茎尖长到1.0‑2.0cm时成外植体无菌苗；(四)不定芽诱导培养：将外植体无菌苗接种到不定芽诱导培养基中，在同上组培条件下培养22‑25天至形成初代不定芽并长到1.0‑3.0cm；(五)不定芽增殖培养：将上述的初代不定芽苗接种到增殖培养基中，在同上组培条件下培养10‑15天至形成继代不定芽苗并长到3.0‑6.0cm；(六)小苗生根培养：将上述的继代不定芽苗接种到生根培养基中，在同上组培条件下培养12‑15天，小苗长至4‑8cm且至少具有3条≥长2cm的根时，即成可以出培养室的组培瓶苗；(七)组培苗的炼苗驯化与移栽：将组培苗瓶移至普通大棚温室中；先拧 松组培瓶盖培养2天，再开盖培养5天后，出瓶、洗净根部培养基移栽入泥炭∶珍珠岩＝4∶1的基质中，按常规肥水管理至长成成品苗，出圃。