[发明专利]一种中国被毛孢的生产方法

摘要

本发明涉及一种微生物菌种的生产方法，具体是指一种中国被毛孢新品系的生产方法。本发明使用鼠巨噬细胞培养获得细胞动态信息筛选出的中国被毛孢，经多级培养发酵后，通过固液分离技术，将菌丝加以通过300-4000分子量的膜过滤后菌液干燥处理后，制成具有增加免疫功能的保健食品与药品。该方法实现了产业化冬虫夏草菌种的不稳定性，从菌种筛选到培养发酵到固液膜处理，全程数字化标准控制，真正意义上实现标准化生产产业化冬虫夏草的工艺，其精准的筛选方法、快捷的生产速度、纯净的生产工艺、较低的生产成本，可以广泛的为大众所接受。

主权项

一种中国被毛孢的生产方法，其特征在于包括下述步骤：(1)半固体菌种斜面培养：培养基溶于煮沸的水中，调节pH至7.2，在121℃、灭菌30分钟，制成斜面培养基；冷却后放入28℃培养箱培养3天，确认无杂菌污染后，接入中国被毛孢菌种，均匀涂布；控制温度17～19℃培养，培养时间30～45天；然后，放入0～4℃冰箱保存；其中斜面培养基的组成按重量百分比为：脱脂蚕蛹粉2.1～3.0％，玉米粉1.5％，麸皮1～5％，葡萄糖2％，KH2PO40.02％，MgSO40.01％，琼脂1.8％，其余为水；(2)液体菌种摇瓶培养：把斜面培养后的菌种接种到装有液体培养基的摇瓶，在摇床震荡培养，培养温度17～19℃，摇床转速100～120rpm，培养8～13天，接入无菌接种罐内，供液体菌种增殖培养接种用；摇瓶菌种培养基的组成按重量百分比为：脱脂蚕蛹粉2.1～3.0％，玉米粉1.5％，麸皮1～5％，葡萄糖2％，KH2PO40.02％，MgSO40.01％，其余为水；(3)液体菌种增殖培养：液体菌种增殖培养在培养罐中培养，培养条件为：罐压0.03～0.05Mpa，通气量1∶0.2，罐温17～19℃，搅拌速度120～140rpm，培养7～12天；当培养液中葡萄糖糖量快速下降，菌丝生长旺盛，菌丝稠密，菌丝体体积浓度不低于13％，检查无杂菌后，移入发酵罐；液体菌种增殖培养的培养基组成按重量百分比为：脱脂蚕蛹粉2.1～3.0％，玉米粉1.5％，麸皮1～5％，葡萄糖2％，KH2PO40.02％，MgSO40.01％，其余为水；(4)发酵培养发酵培养在培养罐中培养，培养条件为：罐压0.03～0.05Mpa，通气量1∶0.2，罐温17～19℃，搅拌速度120～140rpm，培养9～12天，菌丝体体积浓度达25％以上，葡萄糖降至1.0％，视为发酵终点，放罐；发酵培养基的组成按重量百分比为：脱脂蚕蛹粉2.1％，麸皮5％，玉米粉1.5％，葡萄糖2％，鱼蛋白胨0.25％，肉蛋白胨0.75％，酵母膏0.1％，KH2PO40.02％，MgSO40.01％，其余为水；调节pH至7.2；(5)固液分离：经发酵培养后的发酵液经固液分离器分离，分离出菌丝体和发酵清液；(6)膜分离：将固液分离过程中的发酵清液用300‑4000分子量的膜分离器分离，得膜分离浓液；(7)菌丝体与分离浓液干燥：将膜分离浓液喷入干燥器，与菌丝体一同干燥，干燥温度在80‑100℃，得产品。