[发明专利]一种诱导脐带间充质干细胞分化为内皮细胞的方法

摘要

本发明属生物医学领域，涉及芍药苷诱导脐带间充质干细胞分化为内皮细胞的方法及用途。本发明中，所述的芍药苷具有式（Ⅰ）的结构；所述方法的诱导分化步骤为：将脐带间充质干细胞分别在含有β-巯基乙醇1-100μmol/L和维甲酸1-100μmol/L5%DMEM的培养基中诱导24小时，然后转入含有芍药苷的内皮细胞条件培养基，每隔两天半量换液，诱导10-14天，获得脐带间充质干细胞来源内皮细胞。本发明中，所述的芍药苷的用途和方法可促进脐带间充质干细胞分化，并提高分获效率，可用于缺血性血管疾病的细胞移植治疗；所获得的内皮细胞可进一步制备成细胞制剂，用于缺血性血管疾病的治疗、及血管组织工程的种子细胞应用。

主权项

一种诱导脐带间充质干细胞分化为内皮细胞的方法，其特征在于，将脐带间充质干细胞分别在含有β‑巯基乙醇和维甲酸5%DMEM的培养基中诱导后，转入含有芍药苷的内皮细胞条件培养基，获得所需的内皮细胞，包括以下步骤：（1）无菌条件下获得离体脐带，经含有双抗的PBS清洗，切碎，再经胶原酶和胰酶分别消化，收集单细胞悬液，裂解红细胞，然后接种培养；（2）在含有20%胎牛血清、1‑50ng/mlbFGF的间充质干细胞培养基中培养，隔天换液，3‑4天传代后得到胎脐带充质干细胞；（3）上述制得的脐带间充质干细胞在含有β‑巯基乙醇1‑100μmol/L培养基中诱导24小时后，在1‑100μmol/L 5%DMEM的培养基中诱导24小时；（4）将上述诱导后的脐带间充质干细胞，转入含有芍药苷的内皮细胞条件培养基，每隔两天半量换液，诱导10‑14天，获得脐带间充质干细胞来源内皮细胞。