[发明专利]一种通过精原干细胞获得动物永久转基因的方法、重组质粒和永久转基因的生殖细胞无效

专利信息
申请号: 201110082917.7 申请日: 2011-04-02
公开(公告)号: CN102212526A 公开(公告)日: 2011-10-12
发明(设计)人: 曹文广 申请(专利权)人: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
主分类号: C12N15/12 分类号: C12N15/12;C12N15/63;C12N5/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明一种通过精原干细胞获得动物永久转基因的方法、重组质粒和永久转基因的生殖细胞,属于基因工程技术领域。本发明所述的通过精原干细胞获得动物永久转基因的方法包括下述步骤:(1)扩增目的基因片段;(2)将扩增的目的基因片段与Lenti-GFP-T2A载体连接,获得重组质粒;(3)将步骤(2)的重组质粒在293T细胞中进行高效包装;(4)将步骤(3)的外源包装质粒分别注入曲细精管和睾丸其它部位,获得永久转基因的生殖细胞。本发明具有超高转基因效率,整体转基因效率可达90%以上;能够持续产生转基因精子;而且转基因精子应用方便;可以形成稳定的永久性的转基因的优点。
搜索关键词: 一种 通过 干细胞 获得 动物 永久 转基因 方法 重组 质粒 生殖细胞
【主权项】:
一种通过精原干细胞获得动物永久转基因的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:以超声波影像引导,用B型超声波抬头找到睾丸网,顺长轴方向进针,缓慢将外源包装质粒注入曲细精管和睾丸其他部位,得到动物永久转基因生殖细胞。
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