[发明专利]超声波辅助花粉介导植物转基因方法有效
| 申请号： | 201110041484.0 | 申请日： | 2011-02-18 |
| 公开（公告）号： | CN102127567A | 公开（公告）日： | 2011-07-20 |
| 发明（设计）人： | 孙毅;崔贵梅;郝曜山;杜建中;王亦学;杨利艳;张红梅;张丽君;王铭;张婷婷 | 申请（专利权）人： | 山西省农业科学院生物技术研究中心 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82 |
| 代理公司： | 太原市科瑞达专利代理有限公司 14101 | 代理人： | 李富元 |
| 地址： | 030031 *** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 一种改良的超声波辅助花粉介导植物转基因方法，目的目的是显著提高超声波处理花粉授粉后植株的结实率，进而提高每次处理获得的转化体数；本发明方法以携带外源基因片段的农杆菌Ti质粒、大肠杆菌质粒或其它DNA载体为基因供体，以植物花粉为受体，在经过通气和低温处理的5—50%的蔗糖溶液中使花粉与外源DNA混合，通过超声波辅助作用使外源基因转移到受体花粉中；然后将处理花粉授到植物柱头上，并在籽粒成熟时予以收获；在随后的生长季将转化处理花粉授粉后收获的种子播种，并通过对萌发种子和幼苗的筛选，对成苗株样本DNA的PCR扩增及Southern杂交，进一步确定转化株。本发明方法不需进行组织培养，没有物种及基因型依赖性，能缩短转基因育种年限并节省人力和物力。 | ||
| 搜索关键词： | 超声波 辅助 花粉 植物 转基因 方法 | ||
【主权项】：
一种超声波辅助花粉介导植物转基因方法，其特征是以携带外源基因片段的农杆菌Ti质粒、大肠杆菌质粒或其它DNA载体为基因供体，以植物的雄配子体花粉为受体，在经过通气和低温处理的浓度为5—50%的蔗糖溶液中使花粉与DNA片段混合，通过超声波辅助作用使外源基因转移到受体花粉中；然后将花粉悬浮液略微静置后倒掉上清液，将并用细刷将沉淀的处理花粉授到植物柱头上，并在籽粒成熟时予以收获；在随后的生长季将转化处理花粉授粉后收获的种子播种，通过对萌发种子和幼苗的筛选，对成苗株样本DNA的PCR扩增及Southern杂交，进一步确定转化株。
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