[发明专利]一种从提取苦豆子总碱后的剩余药渣中提取多糖的方法

摘要

本发明涉及一种从提取苦豆子总碱后的剩余药渣中提取多糖的方法，包括以下步骤：(1)粉碎；(2)醇提；(3)水提；(4)醇沉；(5)酶解、脱色及除蛋白；(6)柱层脱色分离。该方法可使苦豆子中多糖充分发挥其机体免疫调节功能及增强化疗药物抗肿瘤作用的功效；经本工艺所得苦豆子多糖纯度可以达到95％以上，且产率高，成本低，反应条件易于控制。

主权项

一种从苦豆子提取苦豆子生物总碱后的药渣中提取多糖的方法，包括以下步骤：(1)粉碎：取苦豆子原药材，粉碎，过10‑60目筛；(2)醇提：取步骤(1)过筛后的苦豆子，将其装入渗漉柱内，用浓度为30％‑100％的乙醇浸泡18‑24h；再以浓度为30％‑100％的乙醇为溶剂，以流速10‑15ml/min，渗漉提取，得到苦豆子中所含生物碱成分；至渗漉提取液与碘化铋钾反应无颜色变化时停止渗漉，分离渗漉液与残渣；取苦豆子提取苦豆子生物总碱后的药渣，晾干备用；(3)水提：向步骤(2)晾干后的固体产物中加入体积为该固体产物6‑15倍量的水，于60‑110℃，回流1‑5h得水提物；(4)醇沉：将步骤(3)得到的水提物于35‑90℃减压浓缩成密度为1.02‑1.1的液体，加入乙醇至乙醇终浓度为40‑90％醇沉，4℃冰箱放置10‑48h，以2000‑5000r/min速率离心，取沉淀，得苦豆子粗糖提取物，粗糖提取物经水复溶后，再加入乙醇至浓度为70％‑90％放置10‑48h，以2000‑5000r/min速率离心，取沉淀，冷冻干燥得棕褐色苦豆子粗糖粉末；(5)酶解、脱色及除蛋白：取上述苦豆子粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于85‑95℃保温20‑40min；加质量百分数为1‑3％的活性炭于40‑70℃回流30‑50min脱色、以2000‑5000r/min速率离心；取上清液采用Sevage法脱蛋白，重复3‑5次，取水层浓缩、醇沉、离心、冷冻干燥，得到灰白色粉末；(6)柱层脱色分离：将上述灰白色粉末和载体按重量比为1∶10‑100的比例上样，采用浓度为0.01％‑2％的醋酸铵溶液或氯化钠溶液洗脱液梯度洗脱，将洗脱液浓缩，透析24‑48h，醇沉，过夜，以2000‑5000r/min速率离心，取沉淀冷冻干燥，得到白色苦豆子多糖粉末。(7)柱层纯化分离：将上述白色苦豆子多糖粉末和载体按重量比为1∶10‑100的比例上样，采用浓度为0.01％‑2％的醋酸铵溶液或氯化钠溶液洗脱液梯度洗脱，将洗脱液浓缩，透析24‑48h，醇沉，过夜，以2000‑5000r/min速率离心，取沉淀冷冻干燥，得到苦豆子多糖。