[发明专利]分离的激动剂型抗EDAR单克隆抗体的制备

摘要

本发明涉及本质上纯化的激动剂型抗EDAR单克隆抗体、或者分离的单克隆抗体片段、或者抗原结合部分或其片段的制备。本发明进一步涉及分离的激动剂型抗EDAR单克隆抗体、或者分离的单克隆抗体片段、或者抗原结合部分或其片段，以及它们在治疗X-连锁少汗型外胚层发育不良和牙齿发育不全中的用途。本发明也涉及一种药物组合物，该药物组合物包含所述分离的激动剂型抗EDAR单克隆抗体、或者分离的单克隆抗体片段、或者抗原结合部分或其片段，本发明还涉及一种治疗X-连锁少汗型外胚层发育不良和牙齿发育不全的方法。最后，本发明涉及一种药物试剂盒，该试剂盒包含所述分离的激动剂型抗EDAR单克隆抗体、或者分离的单克隆抗体片段、或者抗原结合部分或其片段。

主权项

一种生产激动剂型抗EDAR单克隆抗体、或者分离的单克隆抗体片段、或者抗原结合部分或其片段的方法，该方法包括如下步骤：a)生产小鼠和/或人和/或脊椎动物种的EDAR抗原、或EDAR片段、或EDAR融合蛋白；b)用所述EDAR抗原、或EDAR片段、或EDAR融合蛋白免疫接种EDAR缺乏的小鼠；c)检测免疫接种了所述EDAR抗原、或EDAR片段、或EDAR融合蛋白的EDAR缺乏的小鼠的血清中的抗EDAR抗体；d)生产骨髓瘤细胞和来自免疫接种了EDAR抗原、或EDAR片段、或EDAR融合蛋白的EDAR缺乏的小鼠的淋巴结细胞间的杂交瘤；e)通过下述i.的方法鉴定识别人EDAR和/或小鼠EDAR和/或来自脊椎动物种的EDAR的激动剂型抗EDAR抗体、或者分离的单克隆抗体片段、或者抗原结合部分或其片段在如下ii.和iii.方面的能力：i.利用经设计用于检测所述激动剂型抗EDAR抗体、或者分离的单克隆抗体片段、或者抗原结合部分或其片段与人和/或小鼠EDAR抗原、或EDAR片段、或EDAR融合蛋白之间的结合的结合分析；和ii.在表达EDAR或EDAR融合蛋白的细胞或组织中诱导体外生物学应答的能力；iii.在表达EDAR或EDAR融合蛋白的生物体中诱导体内生物学应答的能力；f)基于步骤e)ii和步骤e)iii，选择生产激动剂型抗EDAR单克隆抗体的杂交瘤系；g)对上述选择的杂交瘤系进行克隆和亚克隆；h)对得到的激动剂型抗EDAR单克隆抗体、或者分离的单克隆抗体片段、或者抗原结合部分或其片段进行纯化。