[发明专利]哈维氏弧菌外膜蛋白ompK抗原的制备方法、应用以及表达该抗原的菌株无效
| 申请号： | 201010619557.5 | 申请日： | 2010-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN102161974A | 公开（公告）日： | 2011-08-24 |
| 发明（设计）人： | 毛芝娟;何超军;陈吉刚;吴雄飞 | 申请（专利权）人： | 毛芝娟 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/31;C12N15/81;C07K14/28;A61K39/106;A61P31/04;C12R1/84 |
| 代理公司： | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人： | 张一平 |
| 地址： | 315100 浙江省宁*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及哈维氏弧菌外膜蛋白ompK抗原的制备方法、应用以及表达该抗原的菌株。本发明以哈维氏弧菌致病菌株zj2008株为模板，用PCR法克隆抗原ompK的编码基因，将该基因构建到真核表达载体pPIC9K中获得重组载体pPIC9K-ompK；重组载体线性化后转化毕赤酵母细胞GS115，经抗性筛选和PCR鉴定获得整合了重组载体的阳性酵母克隆；重组的酵母经甲醇诱导分泌表达ompK，分子量约为36kDa，产量达2mg/L。重组酵母经甲醇诱导表达3天后离心，收集上清，浓缩后获得粗纯化的蛋白溶液，以浓缩后的蛋白抗原制口服疫苗，免疫实验鱼，一段时间后对攻击感染产生有效的免疫保护性。 | ||
| 搜索关键词： | 哈维 弧菌 膜蛋白 ompk 抗原 制备 方法 应用 以及 表达 菌株 | ||
【主权项】：
一种毕赤酵母重组菌株(Pichiapastoris)GS115‑ompK，它的保藏编号为CGMCCNo.4362，其具有分泌表达如序列<400>2的氨基酸序列的可溶性哈维氏弧菌外膜蛋白ompK抗原的能力。
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