[发明专利]一种检测甾体类激素及多环芳烃的高效微生物荧光传感器

摘要

一种检测甾体类激素及多环芳烃的高效微生物荧光传感器，属于分子生物学及微生物学技术领域，其特征是：将质粒pK-3α-GFP3和p6共转化进大肠杆菌中，在重组质粒pK-3α-GFP3的顺势β-半乳糖苷酶启动子基因下游依次插入了3α-HSD启动子等调控序列468碱基对及GFP报告基因722碱基对；当环境中存在雌激素等底物时，可以诱导p6质粒上3α-HSD的调控序列表达调控作用的蛋白。有益效果是：检测范围比其它检测方法高出3个数量级以上，利用质粒pTopo-3α-GFP3对绿色荧光蛋白的表达具有放大、增强效应，与原绿色荧光蛋白标记的传感器相比，不同甾体类激素、多环芳烃的标准检测液的检测线性范围可高出1到6个数量级。检测时间较短。具有检测体积小，稳定、快速、高效的特点。

主权项

一种检测甾体类激素及多环芳烃的高效微生物荧光传感器，其特征是：将质粒pK‑3α‑GFP3和p6共转化进大肠杆菌中，建立了一种绿色荧光蛋白标记的微生物荧光检测系统；在重组质粒pK‑3α‑GFP3的顺势β‑半乳糖苷酶启动子基因下游依次插入了3α‑HSD启动子等调控序列468碱基对及GFP报告基因722碱基对；重组质粒p6含有3α‑HSD全部调控基因，共5200碱基对；当环境中存在雌激素等底物时，可以诱导p6质粒上3α‑HSD的调控序列表达调控作用的蛋白，该蛋白可使质粒pK‑3α‑GFP3上的启动子启动进而表达出GFP蛋白，此时GFP的表达量严格受到诱导底物量的控制。