[发明专利]一种检测甾体类激素及多环芳烃的高效生物化学发光传感器

摘要

一种检测甾体类激素及多环芳烃的高效生物化学发光传感器，属于分子生物学及微生物学技术领域，其特征是：将质粒pTopo-3α-F1和质粒p6转化进大肠杆菌中，建立了一种发光检测系统，重组质粒p6含有3α-HSD全部调控基因，共5257碱基对；当环境中存在雌激素等物质时，可以诱导p6质粒上3α-HSD的调控序列表达调控作用的蛋白，该蛋白可使质粒pTopo-3α-F1上的启动子启动进而表达出荧光素酶，加入荧光素酶底物后，能够产生化学发光，此时发光强度严格受到诱导物含量的控制。有益效果是：与绿色荧光蛋白基因相比，检测发光强度高出十倍以上，且检测系统稳定。表达具有放大、增强效应，进一步扩大了检测的线性范围。可应用于所有甾体类激素及多环芳烃的检测。

主权项

一种检测甾体类激素及多环芳烃的高效生物化学发光传感器，其特征是：将质粒pTopo‑3α‑F1和质粒p6分别转化进大肠杆菌中，建立了一种萤火虫荧光素酶基因标记的高效生物化学发光检测系统，在重组质粒pTopo‑3α‑F1的顺势β‑半乳糖苷酶启动子基因下游依次插入了3α‑HSD启动子等调控序列470碱基对及萤火虫荧光素酶报告基因1647碱基对；重组质粒p6含有3α‑HSD全部调控基因，共5257碱基对；当环境中存在雌激素等物质时，可以诱导p6质粒上3α‑HSD的调控序列表达调控作用的蛋白，该蛋白可使质粒pTopo‑3α‑F1上的启动子启动进而表达出荧光素酶，加入荧光素酶底物后，能够产生化学发光，此时发光强度严格受到诱导物含量的控制。