[发明专利]一种EV71病毒样颗粒及以其制备的手足口病疫苗无效
| 申请号： | 201010585028.8 | 申请日： | 2010-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN102154229A | 公开（公告）日： | 2011-08-17 |
| 发明（设计）人： | 张定梅;陆家海;曹开源;黎孟枫 | 申请（专利权）人： | 张定梅;陆家海;曹开源;黎孟枫 |
| 主分类号： | C12N7/04 | 分类号： | C12N7/04;A61K39/125;A61P31/14 |
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| 地址： | 510080 广东省广州市中*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种EV71病毒样颗粒及以其制备的手足口病疫苗，所述EV71病毒样颗粒按照以下步骤制备：(1)重组质粒的构建：用肠道病毒EV71的P1蛋白基因和3CD蛋白酶基因与pGAPZαA质粒分别连接后构建P1-pGAPZαA和3CD-pGAPZαA重组质粒；(2)重组质粒转入表达菌株：所述重组质粒依次转入毕赤酵母SMD1168表达菌株，得到P1-pGAPZαA-3CD-pGAPZαA-SMD1168重组表达菌株；(3)菌体培养及EV71病毒样颗粒纯化：培养所述毕赤酵母重组表达菌株，离心分离上清液，所述上清液经超速离心后的沉淀用蔗糖密度梯度离心，获得EV71病毒样颗粒。本发明的EV71病毒样颗粒易于通过菌体培养获得，稳定性好、易于纯化，适于制备疫苗，且便于工业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 ev71 病毒 颗粒 以其 制备 手足 疫苗 | ||
【主权项】：
一种EV71病毒样颗粒，其特征在于，所述EV71病毒样颗粒的制备方法包括：(1)重组质粒的构建：用EV71病毒的P1蛋白基因和3CD蛋白酶基因与pGAPZαA质粒分别连接后构建P1‑pGAPZαA和3CD‑pGAPZαA重组质粒；(2)重组质粒转入表达菌株：所述重组质粒依次转入毕赤酵母SMD1168表达菌株，得到P1‑pGAPZαA‑3CD‑pGAPZαA‑SMD1168毕赤酵母重组表达菌株；(3)菌体培养及EV71病毒样颗粒纯化：培养所述毕赤酵母重组表达菌株，离心分离上清液，所述上清液经超速离心后的沉淀用蔗糖密度梯度离心，获得EV71病毒样颗粒。
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