[发明专利]肿瘤细胞代谢放射性气体的收集方法

摘要

本发明涉及一种肿瘤细胞代谢放射性气体的收集方法，包括以下步骤：将1.0～3.0×106HCT116细胞接种至培养瓶中，进行培养。细胞贴壁后移除原有培养基，先后加入完全培养基和放射性培养基，并进行密封。加入氢氧化海胺于闪烁瓶，并用翻口乳胶塞及封口膜将闪烁瓶瓶口密封。通过真空采血针组件分别连接培养瓶及闪烁瓶，放入培养箱中培养。结束时，用医用注射器向培养瓶中一次性注入4～10M的H2SO4，终止细胞代谢反应，将备用细胞计数。注射完毕后，令注射器活塞退至平衡位置，将整个装置在30～40℃下恒温静置12～24小时。最后向闪烁瓶内注入闪烁液，并将闪烁瓶内的液体混匀至澄清，避光后放入计数仪内，测定14CO2的每分放射性计数。本发明的实施步骤相对简单，便于操作。

主权项

肿瘤细胞代谢放射性气体的收集方法，其特征在于包括以下步骤：步骤①，将1.0～3.0×106HCT116细胞接种至培养瓶中，培养至细胞贴壁；步骤②，移除原有培养基，加入2～3ml的完全培养基和100μL的放射性培养基，并对培养瓶进行密封；所述的放射性培养基中含有14C‑葡萄糖；步骤③，加入2～3ml氢氧化海胺于闪烁瓶，将闪烁瓶瓶口密封；步骤④，通过真空采血针组件分别连接培养瓶及闪烁瓶，放入37℃培养箱中培养15分钟至3小时；步骤⑤，培养结束时，用医用注射器向培养瓶中一次性注入H2SO4，终止细胞代谢反应，将备用细胞计数；步骤⑥，注射完毕后，令注射器活塞退至平衡位置，将整个装置在30～40℃下恒温静置12～24小时；步骤⑦，向闪烁瓶内注入5～10mL闪烁液，并将闪烁瓶内的液体混匀至澄清，避光若干小时后，放入计数仪内，测量每分14C放射性计数，测定14CO2的含量。