[发明专利]通过体细胞胚胎诱导四合木再生植株的方法

摘要

本发明公开了一种通过体细胞胚胎诱导四合木再生植株的方法。该方法，包括如下步骤：1)将切下的四合木的茎诱导，形成愈伤组织；2)将步骤1得到的愈伤组织接入胚性愈伤组织诱导培养基中，形成胚性愈伤组织；3)将步骤2得到的胚性愈伤组织进行成熟和萌发培养，形成芽；4)将步骤3的芽接入伸长、生根培养基中，得到所述完整的再生植株。本研究旨在以四合木愈伤组织为外植体诱导出体细胞胚胎、进而形成再生植株，为建立高效稳定的体细胞胚胎发生系统奠定基础，这对于四合木的快速繁殖、基因工程、遗传转化、遗传改良等方面的研究，都有十分重要的意义。

主权项

四合木的胚性愈伤组织诱导培养基，是在1/2MS培养基的基础上添加MES、水解酪蛋白、肌醇、活性炭、CuSO4、AgNO3、6‑BA、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、肌醇、碳源和凝胶剂，得到的固体培养基；所述添加的物质在所述胚性愈伤组织诱导培养基中的终浓度是：MES 0.4‑1.0g/L、水解酪蛋白450‑550mg/L、肌醇80‑120mg/L、活性炭0.3‑0.7g/L、CuSO4 20‑30mg/L、AgNO3 3‑8mg/L、6‑BA 0.5‑1.5mg/L、盐酸硫胺素0.5‑12mg/L、盐酸吡哆醇0.5‑1.5mg/L、烟酸0.5‑1.5mg/L、肌醇90‑110mg/L；所述1/2MS培养基的溶剂是水，溶质如表2所示。