[发明专利]稳定指示自噬的高转移潜能肝癌细胞株及其建立和应用方法无效
| 申请号： | 201010295088.6 | 申请日： | 2010-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN102115730A | 公开（公告）日： | 2011-07-06 |
| 发明（设计）人： | 樊嘉;史颖弘;彭远飞;丁振斌 | 申请（专利权）人： | 复旦大学附属中山医院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/12;C12N15/867;C12Q1/02;G01N21/64;C12R1/91 |
| 代理公司： | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人： | 周濂堂 |
| 地址： | 20003*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生物医学领域，旨在提供稳定指示自噬的高转移潜能肝癌细胞株及其建立和应用方法。本发明通过构建含有EGFP-LC3自噬报告基因的慢病毒表达载体，并使用该表达载体感染具有高转移潜能的肝癌细胞，使宿主细胞稳定高效表达EGFP-LC3，稳定指示细胞自噬变化。应用该细胞株可以于体外和体内建立转移研究模型，观察自噬在转移中的改变，并采用基于Top-hat算子和形态滤波的图像分析方法快速定量分析细胞自噬改变。本发明具有自噬指示稳定可靠、实时灵敏、转移发生确切，自噬定量快速准确、操作简便等特点，可极大地方便自噬与转移的相关研究。 | ||
| 搜索关键词： | 稳定 指示 转移 潜能 肝癌 细胞株 及其 建立 应用 方法 | ||
【主权项】：
稳定指示自噬的高转移潜能肝癌细胞株，其特征是：①稳定指示细胞自噬：细胞稳定表达EGFP‑LC3自噬报告基因，可在激发波长为488nm、发射波长为509nm的条件下用荧光显微镜进行观察，通过EGFP‑LC3的胞内荧光分布改变指示细胞自噬活动，荧光稳定不淬灭；EGFP‑LC3基因整合入宿主细胞基因组，传代不丢失，表达稳定，其荧光强度不随细胞传代而减弱；②细胞具备高转移潜能：细胞在裸鼠皮下成瘤6‑8周或肝脏原位种植5‑6周后可自发形成肺转移。
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