[发明专利]一种连续高通量富集分离磷酸肽的方法

摘要

本发明涉及一种连续高通量富集分离磷酸肽的方法，包括：首先组装微流控器件；然后以微量注射泵作为流体输送动力源，将微流控器件依次用两种预清洗液在30～60s的停留时间下清洗1～3min，向其微通道中输送蛋白酶解产物，经富集、清洗、洗脱后得到富集产物。本发明的分离方法操作简单，可通过调节微量注射泵的推速调控流体在微通道中的停留时间也即与吸附材料的接触时间来自动控制富集条件，避免了常规方法所需的多次重复的人工操作，借助微流控器件的内在优势实现了对磷酸肽的连续、快速、高通量分离及富集。

主权项

一种连续高通量富集分离磷酸肽的方法，包括：(1)微流控器件的组装以石英毛细管作为富集磷酸肽的微流控通道，在其内表面上垂直生长TiO2包覆ZnO(TiO2/ZnO)纳米棒阵列作为磷酸肽的富集吸附材料，选取三根聚四氟乙烯微管，以其中两根微管作为流体输送通道，第三根微管作为流体接收通道，用环氧树脂胶将流体输送微管封接到石英毛细管的一端，流体接收微管封接到另一端；将两根流体输送微管分别与两支置于微量注射泵上的注射器相连，在接收微管处放置流体接收器，即得到了所需微流控器件；(2)磷酸肽在微流控器件中的连续高通量富集将上述微流控器件用预清洗液在30～60s的停留时间下预清洗1～3min，然后向微流控通道输送用负载液按体积比1∶5稀释后的蛋白酶解产物，经富集、二次清洗、洗脱后得到富集产物，并对其进行MALDI-TOF MS分析。