[发明专利]一种天然脑蛋白水解物注射剂及其制备方法

摘要

本发明是一种天然脑蛋白水解物注射剂及其制备方法。该注射剂经过粗提取的胃蛋白酶水解、高温灭活、再酶解，所得上清液进行精提取，经过柱层析、超滤、原液的检定后，进行药液的调配得到天然脑蛋白水解物注射剂。用本发明的制备工艺能得到天然水解的游离氨基酸，而不是外源性“添加”或“修饰”的氨基酸。本品可通过血脑屏障，促进脑内蛋白质的合成，影响呼吸链，具有抗缺氧的保护能力，改善脑内能量代谢。激活腺苷酸环化酶和催化其它激素系统，提供神经递质、肽类激素及辅酶前体。本发明增加了异常毒性、高分子物质等安全性指标，更加保证了产品的临床用药安全。并增加比旋度测定专属性指标，以区分天然提取氨基酸和添加氨基酸。

主权项

一种天然脑蛋白水解物注射剂的制备方法，其特征是按以下步骤制取：(1)粗提取：①胃蛋白酶水解：猪脑组织加入等量水匀浆，50～90℃保温30～50分钟，冷却至20～50℃搅拌加入猪脑重量1～5％的胃蛋白酶，30～60℃搅拌，加入盐酸调pH3.0～5.0，搅拌30～50℃保温1～5小时后停止搅拌，再30～50℃保温1～4小时，收集上清液，沉淀离心，合并上清液；②高温灭活：上清液减压浓缩到猪脑重1/4～1/2的量，100～125℃灭活3～6小时，加水至猪脑重，调pH值5.0～7.0，布袋过滤，每公斤猪脑加入10～20g活性炭，微沸10～30分钟，冷却至40～60℃脱炭，调pH值6.7～7.5；③再酶解：上述脱炭液加入猪脑重量1～3％的胰酶，35～45℃保温1～4小时，调pH值2.0～4.5，静置10～16小时，取上清液，沉淀过滤，合并上清液；(2)精提取：①柱层析：上述上清液上柱后，用水冲洗至pH值2.0～4.0，用1mol/L氨水洗脱，收集洗脱液，pH值在8.0～12.0，每公斤猪脑加入1.0～3.0g氢氧化钠减压浓缩去氨水，浓缩至猪脑重1/5～1/3的量，过夜，去除沉淀，得原液，-20℃冻结保存；②超滤：上述原液解冻后超滤，用10000分子量超滤膜超滤，收集过滤液，定容，按原液标准检定含量后即为调配用原液；③上述原液的检定：(3)调配：根据检测结果计算需加入的同上原液量，计算方法如下：同上原液加入量(ml)＝药液总量(ml)×35.6mg/ml÷原液氨基酸含量(mg/ml)，量取上述计算量的原液，加注射用水至药液总量的90％，混匀，用盐酸溶液调pH值至6.9～7.5，加药液总量0.035％的亚硫酸氢钠，加注射用水至药液总量，混匀，即可。