[发明专利]一种骨形态发生蛋白-2的生物合成方法与应用有效
申请号: | 201010149133.7 | 申请日: | 2010-04-19 |
公开(公告)号: | CN101831432A | 公开(公告)日: | 2010-09-15 |
发明(设计)人: | 姚菊明;张艳红 | 申请(专利权)人: | 浙江理工大学 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/70;C07K14/47;A61L27/54;A61L31/16 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310018 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的生物合成方法和引用,方法包括以下步骤:(1)从人成骨肉瘤细胞MG63细胞系中获得骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因;(2)构建rhBMP-2原核表达载体;(3)构建表达工程菌;(4)进行诱导剂诱导表达;(5)经亲和层析纯化、梯度透析法复性后得到rhBMP-2。本发明的有益之处在于:本发明所选用的材料为人成骨肉瘤细胞MG63细胞系,通过逆转录PCR方法获得rhBMP-2基因,取材方便,纯度高,提取工艺简单,在生物材料、骨组织再生与修复领域具有广阔的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 形态 发生 蛋白 生物 合成 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种重组人骨形态发生蛋白-2的生物合成方法,其特征在于依次包括以下步骤:(1)通过逆转录PCR方法从人成骨肉瘤细胞MG63细胞系中获得骨形态发生蛋白-2基因;(2)应用DNA重组技术,构建rhBMP-2原核表达载体;(3)rhBMP-2原核表达载体转化大肠杆菌宿主细胞,构建表达工程菌;(4)发酵培养工程菌,进行诱导剂诱导表达;(5)将步骤(4)所得表达产物经亲和层析纯化、梯度透析法复性后得到rhBMP-2。
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