[发明专利]以幼嫩植株及幼叶片切块为外植体的君子兰离体繁殖方法

摘要

本发明为花卉繁殖方法，具体涉及君子兰体外无性快速繁殖方法。本发明采用外植体接种及愈伤诱导、丛生芽的诱导、导分化培养、根的诱导、再生植株培养、再生植株移栽等技术快速繁殖君子兰花卉。可以在不影响母株正常发育及繁殖的情况下使君子兰在相对短的时间内大规模繁殖出遗传背景相同、外观整齐的植株；取材不受季节限制；再生周期短；脱分化率及分化率高；生根率高；移栽成活率高，植株移栽后生长状态良好；非常适用于君子兰稀缺品种的快速繁殖；适用于君子兰“叶盘转化法”转基因；平均单株再生苗的成本极低，非常适合工厂化生产。

主权项

以幼嫩植株及幼叶片切块为外植体的君子兰离体快速繁殖方法，其特征是具体步骤如下：1).外植体的获得：取成熟种子，放入无菌超净台中，用75％(体积/体积)酒精浸泡1～2min，用0.1～0.2％(质量/体积)的氯化汞水溶液浸泡10～20分钟，无菌水冲洗3～5遍，将种子接种到不含激素的1/2MS半固体培养基上，20～30℃每天8-12小时光照培养；2).外植体接种及愈伤诱导：待步骤1种苗长出1-2片叶时，将小植株的地上部分，包括幼叶和幼茎切为直径3～5mm的小块，接种在含6-BA1～2mg/L、NAA0.5～2.0mg/L、蔗糖3.0％(质量/体积)的MS半固体培养基上，20～30℃每天40W日光灯照射8～9小时，40～50天继代一次，待长出黄色粒状愈伤时即诱导分化，或用无菌再生植株幼嫩地上部分为外植体；3).丛生芽的诱导：将愈伤转接到诱导分化培养基：MS+KT(2.0～4.0mg/L)+2，4-D(0.2～0.5mg/L)+3.0％(质量/体积)蔗糖，40～50天继代一次，20～30℃每天光照10～12小时，转分化培养基4个月时从一片来源的愈伤分化出121株再生苗；4).根的诱导：再生植株转到1/2MS+蔗糖2％(质量/体积)的生根培养基上，20～30℃每天10～14小时光照；5).再生植株移栽：植株生根后移栽，腐殖土121℃灭菌30～60分钟以上，移栽前将植株上的琼脂或杂物冲洗干净，7天浇一次透水便成活。