[发明专利]检测膜蛋白内化的方法有效
| 申请号： | 200980138526.3 | 申请日： | 2009-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN102187223A | 公开（公告）日： | 2011-09-14 |
| 发明（设计）人： | 于里安·兹维尔;罗伯特·波尔;埃尔韦·安萨奈;米歇尔·芬克;埃里克·特兰凯特 | 申请（专利权）人： | CIS-生物国际公司 |
| 主分类号： | G01N33/566 | 分类号： | G01N33/566;G01N33/58 |
| 代理公司： | 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 | 代理人： | 张淑珍;王维玉 |
| 地址： | 法国*** | 国省代码： | 法国;FR |
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| 摘要： | 一种对目标跨膜蛋白的内化进行检测的方法，所述跨膜蛋白在细胞表面表达，所述方法包括以下步骤：a)用荧光金属复合物标记所述目标蛋白，所述荧光金属复合物的寿命大于0.1ms；b)向反应介质中加入能够引起所述目标蛋白内化的组合物；c)向反应介质中加入调节剂，所述调节剂选自：a.与所述荧光金属复合物相配的荧光FRET受体化合物或非荧光FRET受体化合物，所述FRET受体化合物在反应介质中的终浓度大于10-7M；b.还原剂，其氧化还原电位小于+0.1V，优选为0.25-0.75V；c.与所述荧光金属复合物通过非共价的键合作用特异性结合的试剂；d.金属离子，所述金属离子与稀土金属竞争以形成非荧光金属复合物；d)当所述化合物是荧光受体化合物时，在所述荧光金属复合物的发射波长和/或所述调节化合物的发射波长下，测定反应介质所发出的光；e)将步骤d)中测定的信号与仅经历步骤a)和c)的细胞上测定的参比信号进行比较。用途：对膜蛋白内化进行检测的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 膜蛋白 内化 方法 | ||
【主权项】：
一种对目标跨膜蛋白的内化进行检测的方法，所述跨膜蛋白在细胞表面表达，所述方法包括以下步骤：a)用含有镧系元素或钌的荧光金属复合物标记所述目标蛋白，所述荧光金属复合物的寿命大于0.1ms；b)向反应介质中加入能够引起所述目标蛋白内化的化合物；c)向反应介质中加入调节剂，所述调节剂选自：1.与所述荧光金属复合物相配的荧光FRET受体化合物或非荧光FRET受体化合物，所述FRET受体化合物在所述反应介质中的终浓度大于10‑7M，所述FRET受体化合物的分子量小于50kD；2.还原剂，其氧化还原电位小于+0.1V；3.与所述荧光金属复合物通过非共价的键合作用特异性结合的试剂；4.金属离子，所述金属离子与所述镧系元素或所述钌竞争以形成非荧光金属复合物；d)当所述化合物是荧光受体化合物时，在所述荧光金属复合物的发射波长和/或所述调节化合物的发射波长下，测定所述反应介质所发出的光；e)将步骤d)中测定的信号与仅经历步骤a)和c)的细胞上测定的参比信号进行比较，步骤d)中测定的信号与所述参比信号的差别表示所述目标蛋白的内化。
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