[发明专利]多元细胞信号转导测定

摘要

本发明公开了用于采用成像仪器进行化合物筛选的基于细胞的多元测定的方法。本文所述方法提供关于检测试剂的生物效价、脱靶效应和潜在候选药物的细胞毒性等的高容量的信息。

主权项

用于在单个活细胞群中测量至少一种细胞内事件及细胞相关分析物的方法，其中所述至少一种细胞内事件和所述细胞相关分析物是在所述细胞中运行的协同生物化学过程的各个组分，所述方法包括以下步骤：a)提供含有单个活细胞群的样品；b)让所述单个细胞群中的至少一个活细胞与引起或怀疑引起所述至少一个细胞产生细胞相关分析物的检测试剂接触；c)在所述至少一个细胞中测量物理性质的变化，作为至少一种细胞内事件的度量；d)洗涤所述细胞以去除细胞外液体；e)通过蛋白质‑抗体或肽‑抗体相互作用的免疫细胞化学测定测量所述细胞相关分析物的存在或含量；和f)将所述至少一个细胞中的所述至少一种细胞内事件的变化与所述细胞相关分析物的存在或含量相联系，其中细胞内事件是离子浓度增加和/或基因表达增加；其中所述细胞相关分析物是指在刺激细胞后通常由协同的生化过程或途径产生的细胞组分，这种组分随后可由细胞分泌，但在测量细胞相关分析物的存在或含量时其与细胞在物理上相连；其中所述细胞相关分析物为与细胞膜结合的细胞相关分析物；并且其中所述细胞相关分析物是生长因子、细胞因子、趋化因子或整联蛋白。