[发明专利]香石竹直接体细胞胚发生途径的植株再生方法及专用培养基

摘要

本发明属于植物组织培养领域。涉及花卉植物香石竹的离体繁殖再生完整植株方法。步骤如下：a)将灭菌后的香石竹的花苞接种到胚性愈伤组织诱导培养基上诱导愈伤组织；b)将步骤a)的发育良好的愈伤组织转移到胚性愈伤组织增殖培养基上使其增殖；c)将步骤b)的愈伤组织接种到体胚诱导培养基上，诱导体胚分化，得到成熟体胚；d)得到的成熟体胚转移至体胚成苗培养基上使其再生出完整植株。本发明所采用的外植体不受季节限制，可周年进行组织和细胞培养；离体下的香石竹体胚可以通过胚性愈伤组织不断分化得到，具有良好的分化效果；所述香石竹胚性愈伤组织可长期继代保存并能保持其进一步分化为小植株的能力。

主权项

一种香石竹直接体细胞胚发生途径的植株再生方法，包括下列步骤：a)将灭菌后的香石竹的花苞接种到胚性愈伤组织诱导培养基上诱导出愈伤组织；b)将步骤a)中得到的发育状态良好的愈伤组织转移到胚性愈伤组织增殖培养基上使其增殖；c)挑选步骤b)得到的发育状态良好的愈伤组织接种到体胚诱导培养基：上诱导体胚分化得到成熟体胚；d)将步骤c)得到的成熟体胚接种到体胚成苗培养基上使其再生出完整植株；上述步骤b)的方法还包括将其中的黄色胚性愈伤组织接种到胚性愈伤组织继代培养基上，使其长期继代并保持分化能力；其中：所述的胚性愈伤组织诱导采用的诱导剂选自2.0mg/L的2，4-D和0.2mg/L的6-BA；体胚诱导所采用的诱导剂选自0.2mg/L的2，4-D；上述步骤a)至d)的培养基的组分及配比为：胚性愈伤组织诱导培养基：MS基本培养基；2.0mg/L 2，4-D；0.2mg/L 6-BA；90.0g/L蔗糖，7.5g/L琼脂，加水至1L，灭菌前调培养基的pH至5.8～6.0；胚性愈伤组织增殖培养基：MS基本培养基；蔗糖90.0g/L；琼脂7.5g/L；加水至1L，灭菌前调培养基的pH至5.8～6.0；胚性愈伤组织继代培养基：MS基本培养基；蔗糖90.0g/L；琼脂7.5g/L；加水至1L，灭菌前调培养基的pH至5.8～6.0；体胚诱导培养基：MS基本培养基，2，4-D0.2mg/，蔗糖30.0g/L，琼脂7.5g/L，加水至1L，灭菌前调培养基的pH至5.8～6.0；体胚成苗培养基：1/2MS基本培养基，蔗糖30.0g/L，琼脂7.5g/L，加水至1L，灭菌前调培养基的pH至5.8～6.0。