[发明专利]提高肿瘤细胞克隆形成率的方法无效
| 申请号： | 200910191029.1 | 申请日： | 2009-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN101671652A | 公开（公告）日： | 2010-03-17 |
| 发明（设计）人： | 王清良;卞修武;余时沧;章容;蒋雪峰;王海慧 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 |
| 主分类号： | C12N5/08 | 分类号： | C12N5/08 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司 | 代理人： | 赵荣之 |
| 地址： | 400038重*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高肿瘤细胞克隆形成率的方法，先从原代肿瘤细胞中分离出肿瘤干细胞，再采用单个肿瘤干细胞进行细胞克隆，利用肿瘤干细胞的生物学特性，大大提高了原代肿瘤细胞的克隆形成率，为原代肿瘤细胞的建系、纯化和后期研究等提供了极大的方便，具有良好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 提高 肿瘤 细胞 克隆 形成 方法 | ||
【主权项】：
1、提高肿瘤细胞克隆形成率的方法，其特征在于：包括以下步骤：a、将原代肿瘤细胞用干细胞培养基进行培养，待干细胞球增大至每球含150～250个细胞时，收集干细胞球，用含血清细胞培养基吹打成单细胞悬液并进行细胞计数；b、将步骤a所得干细胞悬液按每孔1个细胞接种至96孔细胞培养板中，用含血清细胞培养基在温度37℃、体积分数为5％的CO2和饱和湿度的条件下培养，12～36小时后置显微镜下计数每孔细胞数，标记只含有1个细胞的培养孔，在相同条件下继续培养，适时添加或更换新鲜的含血清细胞培养基，待细胞达到95％融合后进行传代。
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