[发明专利]一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法

摘要

本发明属植物繁殖技术领域，主要是一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法，包括如下步骤：种子采集、无菌播种、丛生芽增殖培养、壮苗培养、生根培养、移栽。基本培养基为：选用1/6MS～1/3MS培养基，附加蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.4～5.6。本发明的优点是：快速建立无菌组培快繁体系，繁殖速度快，组培苗健壮均匀，移栽成活率高，在短期内形成大量的优良组培苗，进行规模化、生产化生产。

主权项

1、一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：1)、培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：(1)基本培养基：选用1/6MS～1/3MS培养基，附加蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；(2)种子萌发培养基为：1/6MS～1/3MS；(3)增殖培养基为：1/6MS～1/3MS+BA0.1～2.0mg/L+NAA0.01～0.2mg/L；(4)壮苗培养基为：1/6MS～1/3MS+BA0.1～0.5mg/L+NAA0.01～0.1mg/L；(5)生根培养基：1/6MS～1/3MS+NAA0.01～1.0mg/L；2)、种子采集：采用瓶子草为亲本，开花时选取生长健壮的母株进行瓶子草的自交授粉及杂交，授粉后120～150天蒴果成熟时作为外植体用于播种；3)、无菌播种：从蒴果中取出种子，种子在20％硫酸溶液浸种5～10h，再用体积比为75％酒精表面消毒30～45s，无菌水冲洗3遍，然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌20～30min，无菌水冲洗3～5遍；将灭菌处理后的种子在无菌条件下，接种在种子萌发培养基上，在培养条件下培养30～45天后，从种子萌发成实生苗；培养温度为25±2℃，暗培养30～45天，种子萌发后转为光照培养，光照光强为1000～2000Lx，光照时间为12h/d；4)、丛生芽增殖培养：将实生苗接种到增殖培养基上，在培养条件下培养30～45天增殖出丛生芽；根据对幼苗数量的需求，每隔30～45天按同样方法进行幼苗再增殖培养；5)、壮苗培养：将增殖出的丛生芽分割成单芽，接种到壮苗培养基上，在培养条件下培养20～30天后，幼苗苗高生长达3～5厘米；6)、生根培养：将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养，在培养条件下培养20～30天后，幼苗苗高生长达约5～7cm、苗基部长出5～10根细根；7)、移栽：将生根组培苗移栽于泥碳基质中，培育1～2个月至成苗。