[发明专利]一种老龄秤锤树的组织培养方法

摘要

一种老龄秤锤树的组织培养方法，采用多年生秤锤树腋芽茎段为外植体，经消毒灭菌后，接种于启动培养基中，先置于黑暗条件下10-15天，再置于普通日光灯下，每日照光15小时，温度20-25℃、湿度50％-60％，培养45天，分化长成试管芽苗；将长成的芽苗，剪切，转接于经消毒增殖培养基中，进行增殖培养，不断增殖，将增殖的试管芽苗剪切后接种于经消毒壮苗培养基中，进行壮苗培养，35天后去掉基部愈伤组织和部分叶片，留3-4片叶片，接种于经消毒的生根处理产生根原基培养的培养基中，进行生根培养7-10天，取出清洗，移栽到含有泥炭∶黄心土＝1∶1(体积比)的基质中，20天后生根成活，生根率达90％以上。

主权项

1. 一种老龄秤锤树的组织培养方法，其特征是按下列步骤进行：(1)、采用经选育的多年生老龄秤锤树腋芽茎段为外植体，经70％酒精消毒40-50秒，再用0.1％的升汞溶液灭菌10-12分钟(添加吐温201-2滴/100毫升)，用无菌水冲洗3-5次；(2)、在超净的工作台上，无菌条件下，将消毒的外植体接种在经消毒的含有启动培养基的三角瓶中，先将其置于黑暗条件下10-15天后，再置于普通日光灯为光源、光照强度为1500-20001x下，每日照光15小时，温度20-25℃、湿度为50％-60％，培养45天，分化长成试管芽苗；所述的启动培养基为：每升基本培养基含：玉米素(ZT)1.0-2.0毫克、6-苄基嘌呤(BA)0.5-2.0毫克和α-萘乙酸(NAA)0.01-0.2毫克；(3)、将从(2)步中长成的芽苗，剪切，转接于经消毒的含有增殖培养基的三角瓶中，进行增殖培养，不断增殖，视繁殖生产规模需要达1500-2000瓶进入下一步；所述的增殖培养基为：每升基本培养基含：玉米素(ZT)1.5-2.5毫克、6-苄基嘌呤1.0-2.0毫克、α-萘乙酸(NAA)0.01-0.1毫克和柠檬酸(Citricacid)50-100毫克；(4)、将(3)步中培养的试管芽苗，剪切，接种于经消毒的含有壮苗培养基的三角瓶中，进行壮苗培养，35天后进入下一步；所述的壮苗培养基为：每升基本培养基含：玉米素(ZT)0.5-1.0毫克、6-苄基嘌呤0.5-1.0毫克、α-萘乙酸(NAA)0.05-0.2毫克和柠檬酸(Citric acid)50-100毫克；(5)、将(4)步中的试管壮苗，去掉基部愈伤组织和部分叶片，留3-4片叶片，接种于经消毒的含有生根处理产生根原基培养的培养基的三角瓶中，进行生根培养7-10天；所述的生根处理产生根原基培养基为：每升基本培养基含：α-萘乙酸(NAA)0.3-0.8毫克、吲哚乙酸0.5-1.0毫克和柠檬酸(Citric acid)100-150毫克；(6)、将(5)步中生长的带有根原基的无根小苗，取出清洗，移栽到含有泥炭：黄心土＝1∶1(体积比)的基质中，浇透水，保持温度25℃左右，相对湿度85％以上，遮光(前7天)70％，后逐渐见光，20天后生根成活，生根率达90％以上，45天左右，全光照。