[发明专利]用于分离和测定胰酶样品中病毒载量的新方法

摘要

本文中描述了用于从胰酶样品中分离病毒载量的方法以及用于以高灵敏度定量测定胰酶样品中的病毒载量的方法。

主权项

从胰酶样品中分离病毒载量的方法，包括以下方法步骤：a)在不改变胰酶样品的病毒载量的情况下，由该胰酶样品制备适合于离心的液体胰酶试验样品，b)使方法步骤a)的胰酶试验样品的至少一规定部分经受至少一次低速离心，离心条件使得沉降常数≥120S的病毒还不形成粒状沉淀，c)将在方法步骤b)中在低速离心过程中任选产生的任何固体沉积物弃去，并保留胰酶试验样品上清液，d)使在方法步骤c)中得到的胰酶试验样品上清液的至少一规定的部分经受在不连续梯度介质中的第一次超速离心，其中对该第一次超速离心进行的持续时间和该第一次超速离心的相对离心力进行选择，使得病毒载量定量地从胰酶试验样品上清液中转出到第一目标级分中，所述第一目标级分位于上面的最低浓度梯度组分与在下面的其次较高浓度梯度组分之间的边界层上方或其中，并且将第一目标级分与胰酶试验样品上清液定量分离，所述第一目标级分任选包括在离心后存在的包含病毒载量的任何粒状沉淀；e)使在步骤d)中得到的第一目标级分经受第二次超速离心，由此在与第一次超速离心所使用的相同类型的梯度介质上、在比第一次超速离心的相对离心力更高的相对离心力条件下，进行所述第二次超速离心，由此所述梯度介质是浓度比第一目标级分的最低浓度梯度组分的浓度更高的梯度介质，并且f)如下得到包含病毒载量的第二目标级分：将与第一目标级分相对应的上层的上部75％体积/体积或更多的液体弃去，并得到下部级分和不包括在离心后任选存在的任何粒状沉淀的更高浓度梯度介质的整个层，所述下部级分对应于上层的下部25％体积/体积或更少的液体。