[发明专利]一种抗凝溶栓双功能融合蛋白的凝胶层析复性方法

摘要

本发明属于生物制药领域，具体涉及一种抗凝溶栓双功能融合蛋白即水蛭素12肽和瑞替普酶融合蛋白包涵体的凝胶层析复性方法。该方法特征在于：先将变性蛋白进行一定时间氧化复性，然后采用Superdex75进行层析复性。层析复性时先在Superdex75柱内预设一段变性剂浓度梯度，融合蛋白在变性剂浓度梯度降低的过程中恢复其空间构象。同时在缓冲液中添加氧化还原体系和分子伴侣辅助蛋白构象转变。该方法得到的双功能融合蛋白经过一定处理后复性效果更好。该方法的优点在于：操作简单，易于放大，复性后蛋白浓度较高，复性率较高。

主权项

1. 一种抗凝溶栓双功能融合蛋白的凝胶层析复性方法，其特征在于以水蛭素12肽和瑞替普酶融合蛋白的包涵体为原料，变性溶解后得到融合蛋白的变性溶液，变性蛋白先在氧化复性缓冲液中进行氧化复性，然后在具有脲浓度梯度的凝胶层析柱中进行层析复性，最后经过适当后续操作得到具有抗凝溶栓双功能的融合蛋白。