[发明专利]一种牡丹组织培养方法及改良的基本培养基

摘要

本发明提供一种用于牡丹组织培养的方法，包括下列步骤：(1)外植体的灭菌；(2)灭菌处理后的外置体接种于基本培养基PM；(3)外植体转接到增殖培养基中继续培养。本发明还提供一种更适于牡丹组织无菌培养的改良的基本培养基PM和增殖培养基。在本发明的牡丹组织的无菌培养方法中，采用将外植体先用70％酒精消毒，然后用0.2－0.5％次氯酸消毒，剥去外植体外壳，再用0.1％次氯酸再次进行灭菌的方法，大大降低了外植体的污染率，显著提高了组织培养的存活率。此外，发明的基本培养基PM是在MS培养基的基础上，改变了其中的大量元素的组成和含量，减少了基本培养基中盐分的总摩尔数，提高了外植体的增殖率，同时降低了牡丹培养物的褐变，也避免了高盐培养基对植株生长的抑制。

主权项

1. 一种用于牡丹组织无菌培养的基本培养基PM，其组成为：200-700mg/L NH4NO3、300-400mg/L MgSO4·7H2O、150-350mg/L KH2PO4、50-900mg/L CaCl2·2H2O、0-1000mg/L K2SO4、0-1400mg/L Ca(NO3)2·4H2O、1500-2000mg/L KNO3、20-100mg/L FeSO4·7H2O、37.3mg/L Na2-EDTA、22.3mg/L MnSO4·4H2O、8.6mg/L ZnSO4·7H2O、6.2mg/L H3BO3、0.025mg/L CuSO4·5H2O、0.25mg/LNa2MoO4·2H2O、0.83mg/L KI、0.025mg/L CoCl2·6H2O、0.1mg/L盐酸硫胺素、0.5mg/L盐酸吡哆辛、0.5mg/L烟酸VB5、2.0mg/L甘氨酸、100mg/L肌醇。