[发明专利]筛选高效菌株处理高盐度石油开采废水的方法

摘要

本发明公开了一种筛选高效菌株处理高盐度石油开采废水的方法。通过高盐度目标碳源菌的筛选分离纯化；以降解高盐度石油开采废水的COD为目标的优势菌株的第一次复筛；将得到的优势菌株置于实际高盐度石油开采废水中进行驯化；分离出驯化后的优势菌株进行以降解高盐度石油开采废水的COD为目标的第二次复筛，经过多次筛选得到的优势菌株进行组合处理得到最佳混合高效菌；将高效混合菌液接种到废水中。本发明操作简便易行，且节约成本。

主权项

1.一种筛选高效菌株处理高盐度石油开采废水的方法，其特征在于具体步骤为：(1)在无菌操作条件下，分别称取选取的不同污泥，按1g污泥/90ml废水的比例进行稀释混匀；再按10-1进行稀释，分别取1ml菌液接种到高盐度基础培养基上，放于34-35℃恒温培养箱中培养2天；在菌落生长明显的平板上挑取长势良好的菌落接种于含有高盐度选择性筛选培养基的培养皿中，再置于恒温培养箱中培养；其后再反复进行平板划线分离，直至得到高盐度目标降解菌；(2)将粗筛后得到的高盐度目标降解菌接种到基础培养基中，在温度为34-35℃，转速为105-110r/min的摇床中进行富集培养23-24h，取1ml富集培养菌液接入到高盐度石油开采废水中，降解23-24h，考察废水中投菌前后COD的变化，筛选出处理效果较好的菌株；(3)第一次复筛得到处理效果较好的菌株以高盐度基础培养基富集后取10.1-10.3ml接种1∶3的废水中进行第一阶段驯化，即放入到转速110-120r/min，温度为34-35℃的摇床中培养48小时，取1mL接种到2∶3的废水中进行第二阶段的驯化，条件同第一阶段；46-48小时后取10ml接种到全部的废水中驯化两天，条件同第一阶段，分离出驯化后的菌株，将菌株保存在-4℃；(4)将驯化后得到的优势菌株接种到基础培养基中，在温度为34-35℃，转速为105-110r/min的摇床中进行富集培养24h，取1ml富集培养菌液接入到高盐度石油开采废水中，降解70-72h，考察废水中投菌前后COD的变化，筛选出处理效果较好的菌株；(5)挑处理效果较好的菌株接种到基础培养基中于34-35℃、105-110r/min的条件下，振荡培养23-24h，于3900-4000r/min离心10分钟，倒去上清液，用无菌水洗涤菌体，摇匀5-6分钟，于3900-4000r/min离心，倒去上清液，用高盐度无菌水稀释菌体，摇匀按不同菌种均匀组合后，制成混合菌液，使混合菌液的OD值维持在0.085-0.90左右，摇匀后取1ml混合菌液接种到100ml废水中，在34-35℃、105-110r/min的条件下，于摇床中降解23-24h，考察废水中投菌前后COD的变化，得到高效混合菌株；(6)选取高效混合菌株，稀释10倍的单一菌液的OD值为0.085-0.90左右，在无菌条件下，将菌液按(0.8-1.1)∶(0.8-1.1)∶(0.8-1.1)比例混合均匀，用10％稀盐酸溶液和10％氢氧化钠溶液调节废水pH为0.085-0.90，将菌液按接种量为0.65-0.75％接种到废水中，在35℃、105-110r/min的条件下，振荡培养23-24h。