[发明专利]一种从螺旋藻中分离纯化高纯度藻胆蛋白的方法无效
| 申请号： | 200810033874.1 | 申请日： | 2008-02-26 |
| 公开（公告）号： | CN101519425A | 公开（公告）日： | 2009-09-02 |
| 发明（设计）人： | 蔡春尔;何培民;周铭;李晨;李春霞 | 申请（专利权）人： | 上海水产大学 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K1/30;C07K1/34 |
| 代理公司： | 上海智力专利商标事务所 | 代理人： | 瞿承达 |
| 地址： | 200090*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种从螺旋藻中分离纯化高纯度藻胆蛋白的方法。其特征该方法在温度为4℃条件下进行以下各步骤：取螺旋藻，先进行超声波破碎螺旋藻体，超声时间10分钟，间隙破碎，再高速离心30分钟得螺旋藻最初提取液；接着将上述所提取溶液加硫酸铵至40％饱和度，中速离心15分钟后取上清液，继续加硫酸铵至50％饱和度，中速离心15分钟后取沉淀；再接着将沉淀用极低浓度磷酸盐缓冲液溶解后高速离心30分钟，所得上清液用低孔径微孔滤膜过滤，滤液脱盐，脱盐液上羟基磷灰石柱；最后用0.040M至0.060M的磷酸盐缓冲液(pH7.0，含1mmol/L EDTA)将藻蓝蛋白从羟基磷灰石上洗脱下来并收集；用0.10M至0.12M的磷酸盐缓冲液(pH7.0，含1mmol/L EDTA)将变藻蓝蛋白从羟基磷灰石上洗脱下来并收集。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 螺旋藻 分离 纯化 纯度 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
1、一种从螺旋藻中分离纯化高纯度藻胆蛋白的方法，其特征在于该方法在温度为4℃条件下进行以下各步骤：取螺旋藻，先超声波破碎螺旋藻体，超声时间10分钟，超声波破碎以间隙破碎方式进行，再高速离心30分钟得到螺旋藻最初提取液；接着将上述所提取溶液加硫酸铵至40％饱和度，中速离心15分钟后取上清液，继续加硫酸铵至50％饱和度，中速离心15分钟后取沉淀；再接着将沉淀用极低浓度磷酸盐缓冲液溶解后高速离心30分钟，所得上清液用低孔径微孔滤膜过滤，滤液脱盐，脱盐液上羟基磷灰石柱；最后用0.040M至0.060M的磷酸盐缓冲液(pH7.0，含1mmol/LEDTA)将藻蓝蛋白从羟基磷灰石上洗脱下来并收集；用0.10M至0.12M的磷酸盐缓冲液(pH7.0，含1mmol/L EDTA)将变藻蓝蛋白从羟基磷灰石上洗脱下来并收集；所得到的藻蓝蛋白吸收光谱纯度达到4-6(A615nm/A280nm)，变藻蓝蛋白吸收光谱纯度达到4-6(A652nm/A280nm)。
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