[发明专利]大球盖菇菌种保藏方法

摘要

本发明公开了一种大球盖菇菌种保藏方法，包括a)配置引导驯化平板培养基，b)耐冻、耐负压的菌丝体制备；c)菌丝体真空冷冻干燥：将安瓿管放入冷冻干燥机，降温速度为每分钟2℃，冷却至－40℃，恒温预冻1.5小时，然后开启真空泵，在15分钟内真空度达到22.5帕后，以每30分钟隔板温度升高5℃，真空度降低5帕，待隔板温度升高至24℃，真空度降到0.8～1.3帕，样品温度升高至24℃时，真空冷冻干燥完成。本发明通过对大球盖菇菌丝体进行引导驯化，以提高其低温耐冻性、耐负压性及复水成活率等性能，然后制备冷冻管进行保藏。具有适用范围广、保藏期长、成活率高等优点。

主权项

1.一种大球盖菇菌种保藏方法，其特征在于：它包括下列步骤，a)、配置引导驯化平板培养基：培养基组成配方为小麦提取液20g、酵母提取液1g、蔗糖0.75g、乳糖1g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g、氯化钠0.3g、柠檬酸铁0.2g、琼脂1.2g和蒸馏水92.55g，pH6.8，制成无菌平皿，待培养基凝固时，在培养基表面铺设一层多孔纸；b)、耐冻、耐负压的菌丝体制备：待培养基冷却至20～25℃时，将大球盖菇菌种接种至载体上，在25℃无菌培养箱内培养144小时，然后在无菌条件下将载体连同菌种一并取下，并按照安瓿管底部大小剪切至相应大小放置于安瓿管底部，加入保护剂0.1～0.2mL，保护剂配方为脱脂牛奶18g、葡萄糖1g、甘露醇2g、纤维素1g和蒸馏水100ml；c)、菌丝体真空冷冻干燥：将安瓿管放入冷冻干燥机，降温速度为每分钟2℃，冷却至-40℃，恒温预冻1.5小时，然后开启真空泵，在15分钟内真空度达到22.5帕后，以每30分钟隔板温度升高5℃，真空度降低5帕，待隔板温度升高至24℃，真空度降到0.8～1.3帕，样品温度升高至24℃时，真空冷冻干燥完成。