[发明专利]一种医学组织切片染色方法

摘要

本发明提供了一种医学组织切片染色方法，包括以下步骤：石蜡切片脱蜡、水化；将切片放入加热后的苦味酸、甲醛和冰醋酸溶液里，取出后流水冲洗；将切片放入5％硫代硫酸钠溶液中浸泡、经蒸馏水冲洗；将切片放入阿尔辛蓝溶液内浸泡、用流水冲洗；将切片放入预热后的碱性乙醇溶液里浸泡、用流水冲洗；在避光条件下将切片放入苏木素工作液中，用流水和蒸馏水洗；将切片放入藏红花/酸性品红工作液中、经蒸馏水洗；将切片放入磷钨酸溶液内浸泡，再转入冰醋酸内浸泡，经蒸馏水洗；用乙醇脱水；将切片放入乙醇藏红花溶液内浸泡；再用乙醇脱水；封存。本发明的染色方法成本低，染色流程所用时间缩短，染色更加鲜艳，还增加了应用范围。

主权项

1.一种医学组织切片染色方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)如果不是冰冻切片，则取石蜡切片，用常规二甲苯脱蜡、系列乙醇水化；如果是冰冻切片直接进入下一步；(2)将饱和苦味酸75ml、37-40％甲醛25ml和冰醋酸5ml混合均匀制成混合溶液，置于微波炉中，在45℃--55℃加热45秒，将切片放入加热后的溶液里10分钟，取出后流水冲洗10分钟；(3)将切片放入5％硫代硫酸钠溶液中浸泡5分钟，经蒸馏水冲2-3遍；(4)将切片放入1％阿尔辛蓝溶液内浸泡20分钟，再用流水冲洗3分钟；(5)用95％乙醇90ml和氨水10ml配制成碱性乙醇，将碱性乙醇用微波炉在55℃--65℃下预热45秒，将切片放入预热后的溶液里10分钟，取出后用流水冲洗3分钟；(6)将2％苏木素30ml、氯化铁溶液40ml和碘溶液20ml混合均匀配制成苏木素工作液，在避光条件下将切片放入配制的工作液中60分钟，用流水冲洗片刻，经蒸馏水洗3遍，每遍3分钟；其中2％苏木素由苏木素10g和95％乙醇500ml配制，氯化铁溶液由氯化铁12.4g、蒸馏水500ml和浓盐酸5ml配制，碘溶液由碘10g、碘化钾20g和蒸馏水500ml配制；(7)将藏红花储存液80ml和酸性品红储存液20ml混合均匀配制成藏红花/酸性品红工作液，将切片放入藏红花/酸性品红工作液1分钟，取出，经蒸馏水洗3遍，每次3分钟；其中藏红花储存液由猩红1g、蒸馏水99.5ml和浓冰醋酸0.5ml配制，酸性品红储存液由酸性品红0.1g、蒸馏水99.5ml和浓冰醋酸0.5ml配制；(8)将切片放入5％磷钨酸溶液内浸泡5分钟，直接转入1％冰醋酸内浸泡5分钟，再经蒸馏水洗3遍，每次3分钟；(9)用95％乙醇脱水1分钟，100％乙醇脱水2遍，每遍1分钟；(10)将切片放入乙醇藏红花溶液内浸泡7分钟；通过将藏红花6g、无水乙醇100ml放入密封瓶内，再放60℃烤箱48小时，冷却后过滤制成乙醇藏红花溶液；(11)用100％乙醇脱水2遍，每遍1分钟；(12)用二甲苯透明中性树胶封存切片。